CCK-8（CellCountingKit-8）细胞活性和增殖检测是医学研究中常用的实验技术，其原理是该试剂中含有WST-8，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazandye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。以下是CCK-8检测的具体步骤：细胞活性检测1.在96孔板中接种细胞悬液(100ml/孔)。将培养板放在培养箱预培养(在37℃，5%CO2的条件下)。若细胞培养时间较长，培养基颜色或 pH 发生变化，建议更换培养基后再加 CCK-8.江苏cck8 od
CCK-8的原理
所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。为什么是粗略的呢，因为这里没有考虑到细胞代谢水平的高低，有些细胞在***处理后，可能活细胞数不变，但是代谢率低了以后，细胞呼吸减弱，NAD+产生减少，测出的Formazan也会减少，所以此时怎么算呢（此时我就比较怀恋中性红了）？当然也有解决的办法，下期给大家介绍。因此可利用这个原理进行细胞增殖和毒性分析，在吸光度为450时检测读数。颜色也会越深 湖北cck8细胞活性实验CCK8虽好,这些情况下不建议用!
在培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时，还应考虑***的吸收，可在加入***的培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450nm的吸光度作为空白对照。·金属对CCK-8显色有影响：当终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会***5%、15%、90%的显色反应，使灵敏度降级。如果终浓度是10mM的话，将会*****。·悬浮细胞由于染色比较困难，一般需要增加细胞数量和延长培养时间。·加入CCK-8时，如果细胞培养时间较长，培养基颜色或pH值已变化，建议换用新鲜的培养基。·用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定，且要擦拭干净样品板了。
CCK-8没有具体规定反应时间的长短，以具体反映比较好显色的时间为主。因为不同的细胞反应时间、显色标准都不一样，所以一定要设置预实验。预实验中，可以先做几个孔摸索一下接种数量和培养时间。3、悬浮细胞比贴壁细胞难显色。在加入CCK-8培养后，可每隔一小时观测一下颜色的变化情况，或者之间用酶标仪检测更为准确。4、CCK8作用时间越长，OD值就越大，所以对于作用时间也不是越长久越好，要把OD值控制在1左右。5、CCK8要求检测孔内不能有气泡。CCK8细胞增值检测实验简介.
细胞增殖-毒性检测1.在96孔板中配制100ml的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃，5%CO2的条件下)。2.向培养板加入10ml不同浓度的待测物质。3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6,12,24或48小时)。4.向每孔加入10mlCCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡，它们会影响O.D值的读数)。5.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。7.如果暂时不测定O.D值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10ml0.1MHCl溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK-8之前更换新鲜培养基，去掉***的影响。当然***影响比较小的情况可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。cck8试剂盒原理是什么a?浙江cck8 mts
主要是重复性优于MTT；江苏cck8 od
用途：
***筛选、
细胞增殖测定、
细胞毒性测定、
**药敏试验等。
所需设备及仪器：
10ul，100-200ul及多通道移液器
酶标仪（带有450nm滤光片）
96孔培养板
二氧化碳培养箱
培养0.5-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认比较好条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。
测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。 江苏cck8 od
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