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天津cck8检测细胞增殖

来源: 发布时间:2021年11月27日

RIPA细胞裂解液

RIPA裂解液是较可靠的缓冲液之一,其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,该缓冲液能够从细胞质,膜和**白质中提取蛋白质,并且与许 多应用相容,包括蛋白质分析,和蛋白质纯化。RIPA缓冲液不含蛋白酶或磷酸酶,如果需要,可将酶添加到试剂中以防止蛋白质水解并维持蛋白质 的磷酸化状态。一些蛋白激酶和其他酶可能对RIPA缓冲液的组分敏感,导致其活性降低。 在这种情况下,准备不含脱氧胆酸钠和SDS的RIPA缓冲液。

注意事项:

1.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

2.裂解得到的蛋白样品,含有较高浓度的去垢剂,不建议用Bradford 法测定蛋白浓度,可以选用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。

3.裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NFKB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。 细胞增殖的研发途径。天津cck8检测细胞增殖

细胞计数试剂盒-8(CCK-8)允许使用WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺基苯基)-2H-)进行方便的分析四唑盐,一钠盐),其在电子载体1-甲氧基PMS存在下生物还原时产生水溶性甲dye染料。将CCK-8溶液直接添加到细胞中,不需要预先混合组分。 WST-8被细胞脱氢酶生物还原为可溶于组织培养基的橙色甲臜产物。产生的甲的量与活细胞的数量成正比。由于CCK-8溶液非常稳定并且几乎没有细胞毒性,因此可以进行更长的孵育,例如24至48小时。

细胞计数试剂盒-8允许灵敏的比色测定法测定增殖和细胞毒性测定中活细胞的数量。检测灵敏度高于任何其他四唑盐,如MTT,XTT或MTS。

苏州edu细胞增殖试剂盒CCK-8溶液可直接加入到细胞中,不需要与其它组分预混,操作方便,检测准确。

Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)是由日本同仁化学研究所(Dojindo)开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为MTT法的替代方法,试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-WST-8,在日本,美国,欧洲等国家地区均持有**,同仁化学研究所于2006年在中国获得了WST-8的注册商标。

CCK-8法与普通的MTT法相比,具有特点:

★灵敏度高,数据可靠,重现性好

★操作简便,省时省力

★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞

★无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低

★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用

★适合于高通量筛选

CCK-8用途:筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、药敏试验

CCK-8试剂盒在国内**科研院所、重点大学、三甲医院被广泛应用,国际认可度高,使用CCK-8发表的中外文献达600多篇,其中截止08年底SCI影响因子IF>10分的论文有37篇,比较高IF26.5分。

产品简介

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase, ***DH)是参与糖酵解的一种关键酶。其高水平组成性表达于几乎所有组织中,因此可作为Western Blot的内参对照。一些生理因素如缺氧、糖尿病等,会使***DH在某些类型的细胞中表达升高。

产品特点

▪用于WB实验,性价比高,推荐稀释比例为:1:1000 - 1:10000

▪常备现货

结果示例

***DH-HRP小鼠单抗经1:4000(泳道1) 和1:8000(泳道2)梯度稀释,

对小鼠肝脏裂解物进行Western Blot分析。 细胞增殖系列产品有哪些?

使用方法:  1.将印记膜从蛋白转印设备中取出,加入合适的封闭液在温室下孵育20-60分钟,同时振荡;  2.将膜从封闭液中取出,与一抗工作液在温室孵育1小时,同时振荡或在28℃孵育过夜,不振荡;  3.用适当的缓冲液充分洗涤印迹膜。  4.用10-50ng/mL二抗孵育印迹膜约30-60分钟;  5.重复步骤3,以除去未结合的HRP标记二抗(膜与HRP标记二抗孵育后必须进行彻底洗涤);  6.通过混合等份的本产品溶液A和本产品溶液B来制备发光工作溶液。每平方厘米印记膜使用0.1mL发光工作溶液。已配制的工作溶液在室温下可稳定保存8小时。  7.将印迹膜置于新配置的工作溶液中孵育5分钟;  8.去除多余的工作溶液;  9.将印迹膜放在透明的塑料包装或薄片保护膜中,去除气泡10将印迹暴露于X射线胶片或成像系统。上海细胞增殖公司哪家强?北京cck8细胞增殖检测

CCK对细胞几乎无伤害,不伤害细胞,细胞可重复利用。天津cck8检测细胞增殖

CellCountingKit-8(cck8)细胞增值与毒性检测试剂盒是一种基于水溶性四唑盐的细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒。它在电子耦合试剂1-MethoxyPMS存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原为可溶性的橙黄色甲臜(formazan)。甲臜的数量与活细胞的数量成正比。细胞增殖越快、细胞毒性越小、细胞数量越多,则颜色越深,颜色的深浅与细胞数量呈现良好的线性关系。该产品细胞毒性小,对后续实验没有影响,与MTT,XTT,MTS和WST-1相比,此法检测灵敏度更高,线性范围更宽,适用于***筛选,细胞增殖测定,细胞毒性测定和**药敏实验。CCK-8是非放射性的,允许敏感的比色分析来测定细胞增殖和细胞毒性分析中的活细胞数量。  比MTT、MTS或WST-1更敏感对细胞无毒性简单步骤(无需解冻),操作更安全。天津cck8检测细胞增殖

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