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北京cck8成分

来源: 发布时间:2021年05月24日

CCK8检测细胞增殖和毒性实验佰欧晶生物专注于生命科学、医学及药学科研咨询和技术服务,致力于疾病关键基因功能研究,中药功能及机理研究,纳米靶向***研究,**研究整体方案服务。CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。科研狗**值钱的就是时间,不能再被CCK8“拖累”了.北京cck8成分

经验总结及分享: 

CCK8的说明书大家一定要认真阅读,里面很多细节的问题都有提到。而且说明书里提供的一些关于各种细胞的种板数都很有参考价值,因为那是反复验证过的比较好数值。但无论如何,做这个试验一定要摸条件。你就算再懒,这个懒不得,否则你都只是在做无用功。以下言论全部以细胞毒性试验为前提, 如果你做的是促进细胞生长的***的药效实验那就另当别论了。

摸条件包括1、种板数;2、种板后细胞的贴壁生长时间;3、加药后的孵育时间;4、cck8试剂加入量;5、cck8试剂加入后细胞孵育时间。看起来很多,其实这就是一个实验。而且都是种的空白板,也就是不加***,只加细胞和CCK8。 天津cck8检测计算CCK8检测细胞增殖和毒性实验.

3、24小时后,吸出培养基,对照组和空白组每孔各加入100ul无血清培养基,实验组每孔加入100ul基础培养基配制的***,继续作用12或24小时;4、***作用完毕后,每孔加入50ulMTT,继续作用4小时;5、弃掉每孔中的MTT,每孔加入150ul的DMSO或异丙醇。然后震荡10分钟,使孔底的紫色结晶充分溶解;6、在酶联免疫机器上测定吸光度,波长为550nm或490nm。7、细胞存活率=(实验组吸光度值-空白组吸光度值)/(对照组吸光度值-空白组吸光度值)***。

CellCountingKit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。细胞增殖检测——CCK8.

注意事项1、细胞密度:MTT要检测的只是细胞的增殖能力,所以不用保证孔内细胞铺板一定要均匀,只要保证孔与孔之间的细胞数量大致相同就可,也因此细胞重悬很重要。每孔加入之前,都需要吹打混匀细胞,但即便如此也很难保证每个孔的细胞数量大致一致。所以我们设置了6组实验组,以便计算结果时可以有所取舍。2、对于MTT而言,预实验很重要。预实验要摸清楚两点:a)细胞该如何稀释;b)***浓度。网上很多人建议将细胞数稀释到某个数值才是**合适的,但我认为只要保证每个孔内的细胞数在70%左右,且各个孔内细胞数量大致相同就可,不需要强求一定要达到某个数值,现实中,这一步需要多次摸索。化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).上海dmso在cck8的溶剂对照

各有千秋!CCK8之外的选择除了MTT,还可以是LDH.北京cck8成分

CCK-8(CellCountingKit-8)细胞活性和增殖检测是医学研究中常用的实验技术,其原理是该试剂中含有WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazandye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。以下是CCK-8检测的具体步骤:细胞活性检测1.在96孔板中接种细胞悬液(100ml/孔)。将培养板放在培养箱预培养(在37℃,5%CO2的条件下)。北京cck8成分