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来源: 发布时间:2022年02月17日

CCK-8的用途1.细胞增殖测定:细胞增殖实验在很多领域都会用到,比如**相关、损伤后修复等。2.***筛选:在测定一个***的毒性和安全有效浓度时,经常会用到CCK-8。3.细胞毒性测定:这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响,比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。4.**药敏试验:这个是用的比较广的,我见过做**的团队,买CCK-8都是一整箱,一整箱的买,比如果子老师所在的团队,哈哈哈。5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验CCK8细胞增值检测实验简介.江苏cck8数据

注意事项1、细胞密度:MTT要检测的只是细胞的增殖能力,所以不用保证孔内细胞铺板一定要均匀,只要保证孔与孔之间的细胞数量大致相同就可,也因此细胞重悬很重要。每孔加入之前,都需要吹打混匀细胞,但即便如此也很难保证每个孔的细胞数量大致一致。所以我们设置了6组实验组,以便计算结果时可以有所取舍。2、对于MTT而言,预实验很重要。预实验要摸清楚两点:a)细胞该如何稀释;b)***浓度。网上很多人建议将细胞数稀释到某个数值才是**合适的,但我认为只要保证每个孔内的细胞数在70%左右,且各个孔内细胞数量大致相同就可,不需要强求一定要达到某个数值,现实中,这一步需要多次摸索。天津cck8与ic50MTT与CCK8比色法的实验细节和注意事项.

在做一些***毒性试验时,比如做铁死亡途径时,我们加入一个***叫C1,这个时候就需要提前换液,其实我们试过,还是会有一些影响。所以这时我们用中性红检测。我们实验室,通常会用20%的硫酸铜溶液放到细胞孵箱下层,预防******。理应说,硫酸铜分子在水溶液中是硫酸根离子和铜离子,是不会挥发的。但是每次只要是新换的硫酸铜溶液再做CCK-8,结果总是不好,我也不知道是什么原因。之前在我们实验室有发生过这样的事情,这种有深有浅的才是该有的结果。我想说的是在有能力选择范围内,尽量选择好一点的试剂,免得浪费时间。

在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,对于大多数情况孵育2小时左右就可以了。6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度(使用酶标仪之前要提前开启10min预热)测定完成后,保存数据。7.连续五天检测,每天保持一样的时间点加入CCK-8溶液,在培养箱内孵育时间相同。注:若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉***影响。当然***影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。CCK-8用途:***筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、**药敏试验.

CCK-8盒子的选购还记得***次做CCK-8的实验时研究生二年级的时候,当时用的***个盒子是Sigma的,当时的Sigma-Aldrich就是Sigma-Aldrich,还不是现在的Millipore-Sigma。那个盒子给了我莫大的鼓励,因为在那之前做分子克隆一直都不是很顺利。这个盒子是我的硕士老板从美国带回来的,品质有保证,***的结果也是很好的。后面在做CCK-8的实验时,我们在有选择的情况下都会买sigma,下图2是sigma官网的截图。其实也不贵,只是到货时间太慢。与MTT相比,CCK-8和XTT的价格比较贵。天津cck8与ic50

胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到比较好测定时间。江苏cck8数据

实验材料及试剂

96 孔板、CO2培养箱、酒精灯、移液***、酶标仪等;细胞、CCK8等。

实验内容取生长状态良好的对数生长期细胞,每孔按 4×103个接种至 96 孔板中,每组设置8个复孔,置于细胞培养箱中培养,待细胞贴壁后转染相应质粒后。继续培养 48h 后,弃含药培养基,每孔加入新鲜配制的含 10uL的毒性检测液CCK8,置于培养箱中继续培养 4h 后,用酶标仪测波长为450 nm的OD值。实验重复 3 次, 取实验结果的平均值作为**终实验结果。按公式计算生长***率=[(对照组 OD-实验组 OD)/对照组 OD]  ×**,以分组为横坐标,生长***率为纵坐标,绘制细胞生长***率柱状图。 江苏cck8数据

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