CCK-8盒子的选购还记得***次做CCK-8的实验时研究生二年级的时候，当时用的***个盒子是Sigma的，当时的Sigma-Aldrich就是Sigma-Aldrich，还不是现在的Millipore-Sigma。那个盒子给了我莫大的鼓励，因为在那之前做分子克隆一直都不是很顺利。这个盒子是我的硕士老板从美国带回来的，品质有保证，***的结果也是很好的。后面在做CCK-8的实验时，我们在有选择的情况下都会买sigma，下图2是sigma官网的截图。其实也不贵，只是到货时间太慢。CCK8试验的总体实验心得.湖北cck8实验数据如何处理
四、方法及步骤：实验一：细胞增殖分析1、制备细胞悬液：细胞计数。2、接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数（约1-2×104），每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做4-6个重复。3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。4、加入10ulCCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议将***头浸入培养液中加入且在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。或者直接配置含10%CCK8的培养基（现用现配），以换液的形式加入。江苏贴壁细胞 cck8操作细节这个CCK-8的英文全称是Cell Counting Kit-8.
。一般情况下，**外一圈的孔只加培养基，不作为测定孔用。在培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时，还应考虑***的吸收，可在加入***的培养基中加入CCK8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度作为空白对照。金属对CCK-8显色有影响：当终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会***5%、15%、90%的显色反应，使灵敏度降级。如果终浓度是10 mM的话，将会*****。悬浮细胞由于染色比较困难，一般需要增加细胞数量和延长培养时间。
在做一些***毒性试验时，比如做铁死亡途径时，我们加入一个***叫C1，这个时候就需要提前换液，其实我们试过，还是会有一些影响。所以这时我们用中性红检测。我们实验室，通常会用20%的硫酸铜溶液放到细胞孵箱下层，预防******。理应说，硫酸铜分子在水溶液中是硫酸根离子和铜离子，是不会挥发的。但是每次只要是新换的硫酸铜溶液再做CCK-8，结果总是不好，我也不知道是什么原因。之前在我们实验室有发生过这样的事情，这种有深有浅的才是该有的结果。我想说的是在有能力选择范围内，尽量选择好一点的试剂，免得浪费时间。***筛选：在测定一个***的毒性和安全有效浓度时，经常会用到CCK-8。
CCK-8的原理
所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。为什么是粗略的呢，因为这里没有考虑到细胞代谢水平的高低，有些细胞在***处理后，可能活细胞数不变，但是代谢率低了以后，细胞呼吸减弱，NAD+产生减少，测出的Formazan也会减少，所以此时怎么算呢（此时我就比较怀恋中性红了）？当然也有解决的办法，下期给大家介绍。因此可利用这个原理进行细胞增殖和毒性分析，在吸光度为450时检测读数。颜色也会越深 CCK-8试剂中含有WST–8.浙江cck8 od值大于2
不同的种板数对检测***的IC50影响大吗？湖北cck8实验数据如何处理
1、种板数：这个要查文献，看你所用细胞别人有无做过，把范围大致找出。记住还要参考说明书，这个很重要。然后稀释一系列浓度种板。首先你要观察多长时间细胞可贴壁完全，一般贴壁生长24小时。然后还有在你的实验时间内，不同细胞数下孔内生长情况。比如我拟定考察4天的时间，那么在4天内，细胞是刚好铺满还是堆积生长？因为每块板都会设置对照孔，也就是含有细胞的培养基+CCK8，这个数值是板上的比较大数值，CCK8试验比较好OD值在1.0附近，所以这个比较大数值比较好能控制在1.0左右。我的实验经验是不要让细胞长满，一旦长满了很难去判断是否堆积生长了，对***能否顺利进入细胞有影响此为其一，其二生长不均匀易导致孔间OD值数据偏差大，而且OD值也很大。湖北cck8实验数据如何处理