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上海cck8设计

来源: 发布时间:2022年02月10日

CCK8的优点:方法方便,不用洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;CCK-8快速检测;CCK-8检测灵敏度高,细胞密度低也可以检测;CCK-8的重复性优于MTT法;CCK-8对细胞的毒性很小;CCK-8细胞活性检测试剂中是1瓶溶液,不需要现用现配,即开即用。CCK8的缺点:相比于与MTT法,CCK8的价格比较昂贵生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。用途:***筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、**药敏试验。酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰;上海cck8设计

细胞增殖实验就是对细胞生长的测定,常用的方法有MTT、CCK8以及流式检测。阅读大量文献发现,如果想证明一个***或者说是一个作用条件对细胞生长的影响,基本上大家都采用MTT或CCK8结合流式的双标准来证明作用效果。所以,***先给大家介绍一下MTT和CCK8比色法的实验操作和注意事项。MTT实验操作1、在96孔板中培养细胞,设置对照组(细胞+无血清培养基)、实验组和空白组(无血清培养基),可以采用如下图的排版方式:2、在对照组和实验组中,每孔加入细胞悬液100ul,培养24小时浙江cck8实验数据怎么用统计学处理化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).

CCK-8的原理

所以粗略的可以认为生成的甲瓒物的颜色的深浅与活细胞的数量成正比。为什么是粗略的呢,因为这里没有考虑到细胞代谢水平的高低,有些细胞在***处理后,可能活细胞数不变,但是代谢率低了以后,细胞呼吸减弱,NAD+产生减少,测出的Formazan也会减少,所以此时怎么算呢(此时我就比较怀恋中性红了)?当然也有解决的办法,下期给大家介绍。因此可利用这个原理进行细胞增殖和毒性分析,在吸光度为450时检测读数。用途及常用的公

氧化还原试剂对CCK8测定的影响:CCK8是一个氧化还原反应实验,在整个操作当中,如果有氧化还原试剂都会影响**终的结果。当有还原性物质存在时会影响CCK8的测定,增加OD值。在有氧化性物质存在时会***测定反应的发生,减少OD值。在高中化学我们就知道金属是氧化还原反应中的重要参与者。各个公司都会告诉你:“终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会***5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降低。如果终浓度是10mM的话,将会*****。”我**开始看到这句话时很懵,因为不知道在操作中怎样会遇到这种情况。下面就分享我能想到或者在操作中真实遇到的。CCK8的实验步骤、实验分组及检测方法.

在培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时,还应考虑***的吸收,可在加入***的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450nm的吸光度作为空白对照。·金属对CCK-8显色有影响:当终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会***5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10mM的话,将会*****。·悬浮细胞由于染色比较困难,一般需要增加细胞数量和延长培养时间。·加入CCK-8时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或pH值已变化,建议换用新鲜的培养基。·用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定,且要擦拭干净样品板了。细胞增殖与毒性检测实验方法及经验总结-CCK-8 法.天津cck8实验结果分析

生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比.上海cck8设计

、***浓度的确定需要做一个时间梯度,铺板和上述相同,只需把各个实验组改成各个作用时间就可以了。至于说***浓度的确定,网上有很多确认方法,个人建议以IC50值作为***浓度即可。计算方法,某园子里都有,就不在这里介绍了。

MTT作用之后,一定要小心吸走培养液,以免将孔内的紫色结晶吸走。有条件的实验室,这一步可以采用离心机将沉淀充分离心到孔底,防止被吸出。如果没有这种类型的离心机,可以在测量吸光度的时候,将酶联免疫的机器震荡时间调制5分钟,**起码可以保证沉淀充分溶解。 上海cck8设计