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湖北细胞增殖cck8实验报告

来源: 发布时间:2022年02月24日

特点不同1、CellCountingKit-8:灵敏度高,数据可靠,重现性好;操作简便,省时省力;水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞;无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低;适合于高通量***筛选。2、MTT法:特点是灵敏度高、经济。三、应用不同1、CellCountingKit-8:主要用途为***筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、**药敏试验。2、MTT法:***用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗*****筛选、细胞毒性试验以及**放射敏感性测定等。对细胞毒性小;6、为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。 缺点.湖北细胞增殖cck8实验报告

在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,对于大多数情况孵育2小时左右就可以了。6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度(使用酶标仪之前要提前开启10min预热)测定完成后,保存数据。7.连续五天检测,每天保持一样的时间点加入CCK-8溶液,在培养箱内孵育时间相同。注:若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉***影响。当然***影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。湖北细胞增殖cck8实验报告不同的种板数对检测***的IC50影响大吗?

培养板对CCK8测定的影响:不同公司的培养板,以及培养板是否经过处理对读数都有一定的影响。所以前后实验要一致。另外在培养箱中,培养板**外一圈的孔容易干燥挥发,从而能导致培养基的体积不一样,增加误差。如果有可能,**外一圈的孔只加高压灭菌的PBS或ddH2O。另外,注意CCK-8不要贴在板壁上。一定要注意是否是***有问题。解决的方案就是可以在测定CCK-8的读数前,换个细胞液,再测定。这样会有一定的影响,但是影响的是所有的,所以均一性还算比较好。

一直都像个新手,从未老道过。所有新手的迷茫与无奈我**能体会。看到园子里有一些同学在问有关CCK8试验的事情,当初我也和他们一样,像个被蜘蛛丝缠住头的迷茫苍蝇一头扎进园子里,期待能找到些解决谜团的只言片语。希望我写的这些非专业文字能够帮助那些在实验室里没有前行者指点迷津的筒子们。当然仁者见仁智者见智,我写的只是个人实验心得,就供参考。欢迎大家拍砖共同进步。实验是简单的,道路是曲折的,时间就是用来浪费的,科研就是自娱自乐使劲折腾。若细胞培养时间较长,培养基颜色或 pH 发生变化,建议更换培养基后再加 CCK-8.

CCK-8没有具体规定反应时间的长短,以具体反映比较好显色的时间为主。因为不同的细胞反应时间、显色标准都不一样,所以一定要设置预实验。预实验中,可以先做几个孔摸索一下接种数量和培养时间。3、悬浮细胞比贴壁细胞难显色。在加入CCK-8培养后,可每隔一小时观测一下颜色的变化情况,或者之间用酶标仪检测更为准确。4、CCK8作用时间越长,OD值就越大,所以对于作用时间也不是越长久越好,要把OD值控制在1左右。5、CCK8要求检测孔内不能有气泡。MTT与CCK8比色法的实验细节和注意事项.浙江cck8作图

在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5% CO2).湖北细胞增殖cck8实验报告

CCK法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较检测方法MTT法XTT法WST-1法CCK法甲臜产物的水溶性差(需加有机溶剂溶解再检测)好好好产品性状粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液使用方法配成溶液后使用现配现用即开即用即开即用检测灵敏度高很高很高高检测时间较长较短较短**短检测波长560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm细胞毒性高,细胞形态完全消失很低,细胞形态不变很低,细胞形态不变很低,细胞形态不变试剂稳定性一般较差一般很好批量样品检测可以非常适合非常适合非常适合便捷程度一般便捷便捷非常便捷湖北细胞增殖cck8实验报告