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湖北cck8成分

来源: 发布时间:2021年11月25日

五、实验注意事项:·若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。·如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉***影响。当然***影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。·当使用标准96孔板时,贴壁细胞的**小接种量至少为1,000个/孔(100μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μl培养基)。与MTT相比,CCK-8和XTT的价格比较贵。湖北cck8成分

酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。

· CCK8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,以免影响结果。

· CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。

· 当在培养箱内培养时,培养板**外一圈的孔**容易干燥挥发,由于体积不准确而增加误差。一般情况下,**外一圈的孔加培养基或者PBS,不作为测定孔用。

· 在培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时,还应考虑***的吸收,可在加入***的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 浙江cck8数据分析cck8结果处理**终结果.

3、24小时后,吸出培养基,对照组和空白组每孔各加入100ul无血清培养基,实验组每孔加入100ul基础培养基配制的***,继续作用12或24小时;4、***作用完毕后,每孔加入50ulMTT,继续作用4小时;5、弃掉每孔中的MTT,每孔加入150ul的DMSO或异丙醇。然后震荡10分钟,使孔底的紫色结晶充分溶解;6、在酶联免疫机器上测定吸光度,波长为550nm或490nm。7、细胞存活率=(实验组吸光度值-空白组吸光度值)/(对照组吸光度值-空白组吸光度值)***。

CCK-8的用途1.细胞增殖测定:细胞增殖实验在很多领域都会用到,比如**相关、损伤后修复等。2.***筛选:在测定一个***的毒性和安全有效浓度时,经常会用到CCK-8。3.细胞毒性测定:这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响,比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。4.**药敏试验:这个是用的比较广的,我见过做**的团队,买CCK-8都是一整箱,一整箱的买,比如果子老师所在的团队,哈哈哈。5.微生物对细胞的毒性或增殖的实验科研狗**值钱的就是时间,不能再被CCK8“拖累”了.

培养基对CCK8测定的影响:不同的培养基中含有氧化还原性物质不同,(主要是氨基酸的成分及糖含量),会与CCK8发生反应,产生实验误差,因此所用培养基要一致,不要更换其他培养基。比如DMEM空白吸收为0.93;1640培养基在0.5左右。另外培养基中有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可,可见空白孔非常重要,所以每次实验均要设定空白对照。另外,血清不影响测定。有师妹在做一个HIF1a***剂实验时,多加了这个***剂的浓度,cck8试剂盒价格是多少?北京cck8 缺点

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在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,对于大多数情况孵育2小时左右就可以了。6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度(使用酶标仪之前要提前开启10min预热)测定完成后,保存数据。7.连续五天检测,每天保持一样的时间点加入CCK-8溶液,在培养箱内孵育时间相同。注:若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉***影响。当然***影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。湖北cck8成分

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