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国内深度测序进化分析排行

来源: 发布时间:2023年06月03日

病毒(Virus)由一种核酸分子(DNA或RNA)与蛋白质(Protein)构成或由蛋白质构成(如朊病毒)。根据遗传物质的组成,可分为单链DNA病毒(ssDNA)、双链DNA病毒(dsDNA)、单链RNA病毒(ssRNA)、双链RNA病毒(dsRNA)和蛋白质病毒(如朊病毒)。根据宿主类型的不同,可以分为噬菌体(细菌病毒)、植物病毒(烟花叶病毒)和动物病毒(如禽流感病毒、天花病毒和HIV等)。病毒全基因组测序(VirusWholeGenomeSequencing,VWGS),是指基于第二代高通量测序技术,对病毒全基因组进行测序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列,解析编码信息,并获得相应的变异信息。


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病毒全基因组测序定:探普生物对病毒的全基因组进行测序的实验基于二代测序技术。样本经过核酸纯化-文库构建-生物信息学分析这3大基本流程后转换成了序列数据。先,在核酸纯化环节,探普提供专门针对性的核酸纯化样本指南,以提高目的物种的核酸纯度和得率,与此同时探普生物也提供核酸纯化服务。第二,文库构建环节,样本的核酸具备浓度低,总量少的特点。探普生物专门针对这一点开发了超微量核酸文库构建,可以将0.01ng/μl甚至更低浓度的核酸构建成测序文库。第三,生物信息学分析环节。生存环境和状态决定了对病毒的全基因组进行测序的下机数据一般都伴随大量的宿主和其他微生物的数据。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,搭载了专门用的的生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。


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人类的病毒性传染很普遍,病毒可以通过呼吸道、消化道、皮肤等多种途径进行传播,常常会导致严重的公共健康问题,对人类的健康造成威胁。传统的病毒检测方法主要依赖于细胞培养法、抗原抗体结合法等,这些方法耗时久,灵敏度低,往往不能够满足临床检测需求。随着分子生物学的发展,PCR方法用于病毒检测的案例越来越多,但该方法的特异性限制了其同时检测其它病毒的能力。因此,需要通过新的技术来实现。随着二代测序技术成本的降低与普及,二代测序在临床病原体检测方面的优势也越加突显。该技术基于二代测序平台,可以直接从样本中获得病原体的核酸序列信息,再通过生物信息学的方法对得到的序列进行分析,可以快速地对样本中可能存在的全部病原体进行鉴定,缩短了临床检测的周期。

病毒全基因组测序具有的特点:1.不预设目标检出物,样本的所有病原信息一网打尽;2.无需培养和特异性扩增,对采集临床样本直接检测;3.独有的一定定量技术,实现病原定量分析,使病原诊断更准确;4.与临床各领域有名**共同打造呼吸道系统、神经内科系统和血流系统传染病原数据库,更加贴合需求;5.采用高通量测序仪,全流程质控,结果稳定可靠;6.整体检出率阳性率较传统方法提升25~30%:肺泡灌洗液检出率60~80%,脑脊液检出率40~60%,血液检出率40~60%;7.专业化服务:临床微生物**出具报告,专业医学团队报告解读。针对疑难报告,由**进行深度解析;8.完善的售后服务:基于PCR技术和抗原抗体技术的售后验证平台,致力于解决临床的每一个疑问。分析不同大小和不同样品类型的UViGs对于探索病毒基因组序列空白是有价值的。

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能实现对病毒的全基因组进行测序的技术手段:早期在高通量测序技术普及之前,对病毒的全基因组进行测序是通过非特异性扩增+克隆结合sanger测序来完成的。当物种有了参考的序列之后,可以通过特异性扩增+sanger测序获得全基因组序列。Sanger测序准确度高,读长很长,但与此同时,扩增和克隆工作费时费力,由于流程繁琐,加上快速变异导致引物无法通用,该方法对于大量基因组的测序工作而言,可操作性不强,这对于研究者一直是一个困扰。高通量测序技术正式启用之后,研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析,减少了工作量,增加了成功率。探普生物进行了大量有针对性的研发和测试,开发了全套的实验和分析流程用于对病毒的全基因组进行测序,该流程自运行以来广受研究者们好评。



想要通过高通量测序获得病毒全序列,需要经历:核酸纯化-文库构建-生物信息学分析这三大基本流程。国内病毒全基因组二代测序分析

在探普生物长时间运行过程中,接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。国内深度测序进化分析排行

全基因组测序要注意的事项:全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。技术路线:提取基因组DNA,然后随机打断,电泳回收所需长度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接头,进行DNA簇(Cluster)制备,后利用Paired-End(Solexa)或者Mate-Pair(SOLiD)的方法对插入片段进行测序。然后对测得的序列组装成Contig,通过Paired-End的距离可进一步组装成Scaffold,进而可组装成染色体等。组装效果与测序深度与覆盖度、测序质量等有关。常用的组装有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。测序深度(Sequencingdepth)是指测序得到的碱基总量(bp)与基因组大小的比值,它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系,测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。测序的个体,如果采用的是双末端或Mate-Pair方案,当测序深度在50X~100X以上时,基因组覆盖度和测序错误率控制均得以保证,后续序列组装成染色体才能变得更容易与准确。



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上海探普生物科技有限公司是以提供病毒测序,病毒全基因组测序,病毒宏基因组测序,未知病原鉴定为主的有限责任公司(自然),公司成立于2018-10-30,旗下探普,已经具有一定的业内水平。上海探普生物以病毒测序,病毒全基因组测序,病毒宏基因组测序,未知病原鉴定为主业,服务于医药健康等领域,为全国客户提供先进病毒测序,病毒全基因组测序,病毒宏基因组测序,未知病原鉴定。产品已销往多个国家和地区,被国内外众多企业和客户所认可。