河北自动搅拌培养基制备仪

培养基的配制：1、配料：在容器中加入少量水，按照配方称取各种药品，加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。2、溶解：淀粉溶解：少量冷水调成糊状，加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95-97℃，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。3、调PH：用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。4、过滤：滤纸或棉花进行过滤。5、分装：一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。(1)三角瓶：若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角瓶，较多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15-20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。(2)试管分装：液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。6、包扎：分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。7、灭菌：按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时，常需在培养基中加入少量螯合剂。河北自动搅拌培养基制备仪

培养基制备的九个步骤关注要点：步骤一：称取数量：用1/100的电子天平称出培养基所需的药物。首先参照配方计算出配制相应培养基需要各成分的数量，然后用电子天平准确称取重量。步骤二：培养基溶化：将培养基纳入烧杯容器中，加小适量的水，缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂，则不需要对培养基加热；相反含有琼脂，就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。步骤三：调培养基pH：虽然培养基中含有缓冲物质，可以尽量使培养基的pH值保持在标准范围内，但如果配制的培养基不能要求，则必须进行必要的调整。如果您有校准过的pH计，则可以使用pH计。步骤四：培养基过滤：如果对配制的培养基没有特殊要求，这一步可以省略。步骤五：培养基分装：准备好的培养基根据用途不同分为烧瓶、试管等容器，分装试管量大采用自动分液器，分装试管量小，可以用漏斗分液。确定这批培养基的较终pH值。步骤六：培养基灭菌处理：分装完成的培养基应马上灭菌。中国澳门大容量 培养基制备仪培养基根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基。

培养基防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自自立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。

培养基的制备：正确制备培养基时微生物检验的较基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分，尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配置。记录所有相关数据，如质量/体积、pH、制备日期、灭菌条件和制备人员等。使用各别成分制备培养基时,应按照配方准确配制,记录所有细节信息,如;培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积(分装体积)、无菌措施(包括实施的方式、温度及时间)、配置日期、人员等,以便潮源。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。

培养基的类型：1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。(1)天然培养基：天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。用作这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源多方面,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。(2)合成培养基合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。(3)半合成培养基。在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。北京Systec培养基制备仪

培养平板培养基也叫平面培养基、平皿培养基。河北自动搅拌培养基制备仪

干粉培养基有哪些注意事项：①熔化培养基制备必须在玻璃容器中进行，如果使用铜或铁器皿，会影响细菌的生长。②注意按照先加水再加颗粒干粉培养基顺序，反之则不利于培养基溶解。③单在必要时进行加热溶解操作，其加热温度也不要过高时间不要过长，主要原因是高温会破坏琼脂和培养基中的一些营养成分。④生产的干粉培养基和颗粒培养基都经过pH校准，使用时无需特殊验证。因为高压会影响pH值，则应在高压后验证pH值。⑤液体培养基通常是预先包装好的，分装时应注意每管的用量不得高于试管的三分之二。⑥高压后冷却至五六十度环境，再导入平板，否则会形成更多的水蒸气，导致细菌分离数量。河北自动搅拌培养基制备仪

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