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正规EdU细胞增殖检测试剂盒原理

来源: 发布时间:2023年12月08日

这一类细胞增殖用荧光标记采用温和的点击实验方案,准确且兼容各种抗体实验方案,整个实验可在30分钟内完成,在结果的数据丰富程度方面,堪比多重分析方法。此外,该方法适用于培养的细胞或组织切片,可用流式细胞术分析检测EdU Flow Cytometry Kit 594(BCK-FC594-100);可进行HCS分析或进行细胞裂解液微孔板检测EdU HTS Kit 594(BCK-HTS594-20);也可适用于培养中的细胞,或通过注射方法进行实验的小动物样本,进行体内成像分析In Vivo EdU Click Kit 594(BCK594-IV-IM-M)、流式细胞检测或HCS高通量检测。(共有488、555、594、647四种荧光染料可选)。EdU细胞增殖检测试剂盒,有哪些好处值得选择?正规EdU细胞增殖检测试剂盒原理

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细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。方式:真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、等一切真核生物中的一种为普遍的分裂方式,是真核细胞增殖的主要方式。减数分裂是生殖细胞形成时的一种特殊的有丝分裂。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞湖北哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒供应商上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好?

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EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。本试剂盒反应简单、检测灵敏度高。本试剂盒基于简单高效的点击反应,无需DNA变性,只需少量的小分子叠氮化物探针即可非常有效地标记出掺入的EdU,并且可以检测到单个细胞的增殖情况。本试剂盒使用便捷、兼容性好。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。

    按照以下的表格进行染色反应液的配制:染色反应液组分500μl1ml2ml5ml1×反应缓冲液430μl860μlmlml催化剂溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA红色荧光溶液μlμl5μlμl缓冲添加剂50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30分钟;4、弃染色反应液,加入100μlTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次,每次10分钟;5、弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次5分钟。DNA染色1、将Hoechst33342用RNase-free水溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5μg/ml的1×Hoechst染色液;2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液,室温避光孵育20-30分钟后,弃染色液;3、每孔加入100μlPBS洗细胞两次,去掉洗液。图像获取及分析建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。EdU细胞增殖检测试剂盒运用再哪些领域?

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    直接测定DNA合成是细胞增殖检测的准确方法之一,的EdU细胞增殖检测试剂盒采用另外一种胸腺嘧啶核苷酸类似物-EdU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷),在细胞增殖时EdU能够插入正在复制的DNA分子中,利用EdU与染料之间的点击化学(ClickChemistry)反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比(图1),更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。EdU分析方法反应条件比较温和,我们提供的一系列AndyFluor™染料标记可以用于多色通道选择。 上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒如何去使用呢?天津哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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EdU细胞增殖检测试剂盒BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(DAB法)(BeyoClick™ EdU Cell Proliferation Kit with DAB),是一种基于DNA合成过程中胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidine)类似物EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)的掺入,并通过随后的点击反应(Click reaction)使EdU被生物素(Biotin)所标记,然后加入的辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(HRP-Streptavidin)与生物素结合,再然后通过DAB显色,从而实现简单、快速、高灵敏地检测细胞增殖的试剂盒。正规EdU细胞增殖检测试剂盒原理