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徐州Biochannel培养基

来源: 发布时间:2023年02月19日

活性炭处理胎牛血清的应用:活性炭处理胎牛血清主要用于受体研究和雌元素相关的细胞研究实验。同时活性炭处理胎牛血清极大的降低了多种元素和生长因子,减少了影响细胞生化分析的干扰因子。性炭处理胎牛血清减少了血清中的类固醇类化合物,3x100nm无菌过滤内有害元素≤10EU/mL,血红素≤20mg/dL。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。胎牛血清提供维持细胞指数生长的激元素、基础培养基中没有或量很少的营养物。徐州Biochannel培养基

为什么有些血清是热灭活的?如何热灭活?哺乳动物血清中天然存在的补体蛋白参与细胞溶解事件、收缩平滑肌、从肥大细胞和血小板中释放组胺和激发淋巴细胞和髓细胞。热灭活破坏了血清中补体的活性,因此免疫学应用,培养胚胎干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时推荐使用。热灭活方法是在56°C水浴中处理30分钟,并每隔大约10分钟旋转一次瓶子。为了保持精确,可使用一个类似大小的瓶子作为对照,对照瓶内放入同等体积的水,并放置一个温度计,在温度到达56°C时开始计时30分钟。热灭活过程必须小心控制,避免血清中支持细胞和组织繁殖的关键蛋白组分发生降解。淮安DMEM(高糖)培养基(含双抗)胎牛血清促细胞生长因子、促帖附因子、元素及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清。

血清是基础培养基中极为重要的细胞生长和粘附因子、元素、脂质和矿物质来源。此外,血清还可调节细胞膜通透性,并可作为向细胞内运送脂质、酶、微量营养素和微量元素的载体。牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清(FetalBovineSerum)是通过无菌手术剖腹后取胎,穿刺心脏采集血液制成。胎牛血清中所含的对培养细胞有害的成分(抗体等)非常少,故质量更高。

血清和血浆均来自全血,通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于,凝血蛋白存在于血浆中,但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的,但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此,与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。在人类中,以下22种蛋白质占血清和血浆总蛋白质含量的99%:白蛋白、总IgG、转铁蛋白、纤维蛋白原、总IgA、α-2-巨球蛋白、总IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3补体、结合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、载脂蛋白-B、载脂蛋白-A1、脂蛋白(a)、因子H、铜蓝蛋白、C4补体、补体因子B、前白蛋白、C9补体、C1q补体和C8补体。剩下的1%包括数百种蛋白质。更丰富的血清蛋白白蛋白,浓度为50mg/ml,约占总蛋白质量的一半。胎牛血清极低内有害元素,达到特级标准,使细胞更健康,实验更顺利。

什么是优良的胎牛血清?外观,好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采集血液的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。血红蛋白,标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。pH,国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。胎牛血清的免疫球蛋白含量要远远低于新生牛血清,胎牛的血清相对来说比较纯。徐州Biochannel培养基

胎牛血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。徐州Biochannel培养基

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