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扬州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐

来源: 发布时间:2022年06月24日

    我们将与LgBiT具有极强亲和作用的。HiBiT作为一种易于检测且具有高灵敏度的蛋白质标签,具有多种功能,例如当与基于CRIPSR的标签一起使用时,可以创建内源性报告基因模型。[1]2020Lumit™技术随着NanoBiT®技术的发展,人们认识到可以利用该系统通过结合免疫测定的组分检测多种分析物。由此产生的平台(现称为“Lumit”)提供了具有高灵敏度的简化免疫检测法。萤光素酶(英语:Luciferase)是自然界中能够产生生物发光的酶的统称,其中**有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的萤光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有萤光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常常可以进一步加速反应(与肌肉收缩的情况相似)。萤光生成反应通常分为以下两步:萤光素+ATP→萤光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧萤光素+AMP+光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有约10%的能量被转化为光,剩余的能量都变为热能而被浪费。萤光素或萤光素酶不是特定的分子。做D-荧光素钾盐测试找哪家公司?扬州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐

    包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO;后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件:4℃冰袋运输;短期保存:4℃干燥避光长期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期长期保存:有效期一年工作液:先用现配使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3)去除细胞培养基。4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10min,然后进行图像分析。2.活题成像分析1)用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。2)用µm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。3)腹腔注射(.)。徐州体外研究D-荧光素钾盐活题成像D-荧光素钾盐测试需要哪些必备条件?

    可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。荧光素酶报告基因有许多优点:①非放射性;②比CAT及其他报告基因速度快;③比CAT灵敏100倍;④荧光素酶在哺乳细胞中的半衰期为3小时,在植物中的半衰期为3.5小时。由于半衰期短,故启动子的改变会即时导致荧光素酶活性的改变,而荧光素酶不会积累。相反,CAT在哺乳细胞中的半衰期为50小时。荧光素酶浓度在10—16mol/L(10pS/L)到10-8mol/L(1mg/L)范围内,荧光信号强度与酶浓度成正比。在理想条件下,可检测到l0-20mol/L的荧光素酶。检测步骤:1.用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。2.设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中。3.筛选阳性克隆,测序。扩增克隆并提纯质粒备用。4.扩增转录因子质粒,提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照,提纯备用。5.培养293(或其它目的细胞),并接种于24孔板中,生长10-24小时(80%汇合度)。6.将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。7.提取蛋白并用于荧光素酶检测。8.加入底物,测定荧光素酶的活性。9.计算相对荧光强度,并与空载对照比较。

    可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。c.验证特定转录因子同其调控序列的作用,将该序列(通常为启动子区域)插入报告基因载体,同时在实验细胞***转过表达该转录因子,可分析转录因子过表达是否提高荧光素酶活性。d.可以分析信号通路是否***,将该信号通路的下游响应原件序列构建入报告基因载体,在不同上游信号条件下,荧光素酶活性**了通路的下游响应。例如在GPCR研究中,将cAMPresponseelement(CRE)载入报告基因载体,构建稳定表达细胞株后,可以用于分析GPRC的***与6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd筛选。又如,将HIF1α的响应原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase报告载体构建稳转细胞株,可以用于低氧相关通路的研究。e.验证microRNA的靶序列,将待测的3’UTR序列插入报告基因载体,再共转入该microRNA,如果荧光素酶活性下降,则提示为其靶序列。Q:在[信诺金达]做荧光素酶报告基因检测,需要提供什么?实验结果包括哪些?您需要提供:1.基因序列或模板,需提供详细的转录因子、目的基因或microRNA信息;2.实验细胞,[信诺金达]默认为使用293T细胞,实验结束后,[信诺金达]会为您提供实验流程及完整报告一份,包括实验原始数据、图片、分析结果等。做D-荧光素钾盐测试哪个公司好?

    GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素-NHS酯5(6)-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素D荧光素钠盐D-Luciferin,SodiumSaltD-荧光素钾盐D-Luciferin,PotassiumSaltD-荧光素萤火虫,游离酸D-LuciferinFirefly,freeacid萤火虫荧光素酶fireflyluciferase海肾荧光素酶Renillaluciferase天然腔肠荧光素Coelenterazineh腔肠素hCoelenterazinef腔肠素fCoelenterazineh/腔肠素h腔肠荧光素活题成像用D-luciferin,potassiumsalt荧光素钾盐介绍一、活题成像技术简介活题生物发光成像技术能够让研究人员直接快速的测量各种哎症模型中肿大的瘤的生长、转移以及对药物的反应。在药效学评价方面,荧光素酶哎症模型可用于哎症体内用药在整体动物水平上进行长期疗效跟踪观察。利用无创伤活题成像对哎细胞生长的检测,可对哎症治的好之前和过程中的哎细胞的变化进行实时观测和评估。荧光素酶的发光是生物发光,不需要激发光,但需要底物荧光素(D-Luciferin)。荧光素酶的底物荧光素,约280道尔顿。荧光素的水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透细胞膜和血脑屏障。荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的,约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素。南京翌科生物科技有限公司D-荧光素钾盐测试价格。荧光素邻丙烯酸

D-荧光素钾盐荧光素酶和ATP水平分析。扬州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐

    荧光素酶(Luciferase)是自然界中能够催化荧光素产生生物发光的酶的统称,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是来自萤火虫体内(Firefly)和海肾(Renilla)体内的两类萤光素酶,分别命名为F-Luciferase和R-Luciferase,同时近年来研究得较多的来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶(Gaussluciferase)。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence),可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光,常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。萤火虫萤光素酶**通用和**常见的报告基因是北美萤火虫photinuspyralis的荧光素酶,该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性。高浓度(体内)甚至没有毒性,可用于原核和真核细胞。Amplite™萤光素酶报告基因检测试剂盒(12518)使用无DTT**配方来定量活细胞和细胞提取物中的萤光素酶活性。该测定基于萤火虫荧光素酶,萤火虫荧光素酶是一种单体的61kD酶,可催化荧光素的两步氧化,在560nm处产生光。Amplite™萤光素酶报告基因检测试剂盒特点:具有优化的“混合读取”测定规程,可与HTS液体处理仪器兼容具有高灵敏度。扬州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐

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