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泰州ATPD-荧光素钾盐发射波长

来源: 发布时间:2022年06月23日

    后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件:4℃冰袋运输;短期保存:4℃干燥避光长期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期长期保存:有效期一年工作液:先用现配使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3)去除细胞培养基。4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10min,然后进行图像分析。2.***成像分析1)用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。2)用µm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射,以小鼠为例,每只小鼠体重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入体内10-15min(待光信号达到更强稳定平台期)后进行成像分析。注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定更高信号检测时间和信号平台期。 D-荧光素钾盐检测公司招代理吗?泰州ATPD-荧光素钾盐发射波长

    故根据荧光反应的情况可以检测样品中的微生物含量。APT荧光检测仪***用于食品、饮用水、餐饮器具等的微生物快速检测。1970年,科学家***次测定了萤火虫荧光素酶的结构;1985年,科学家***克隆了一种萤火虫荧光素酶基因,并在大肠杆菌中表达,从而得到了具有活性的荧光素酶;1986年,科学家们测定了该种萤火虫荧光素酶的基因序列。随后,各种萤火虫荧光素酶基因相继克隆成功,荧光素酶的研究和应用不断发展。目前,荧光素酶发光系统的分析技术已经广泛应用到医学、生命科学、环境科学、微生物学等许多领域。以医学领域为例,**们将荧光素酶基因嵌入到*细胞中,再注入荧光素,使*细胞发光,通过探测荧光,就能监测*细胞的扩散和转移。同理,用这种方法能对致病基因、***免疫机制等进行研究,对某些疾病进行诊断,监测疫苗、药物和治疗方法的效力。氧化荧光素南京翌科生物科技有限公司的D-荧光素钾盐测试怎么样?

    具体实验流程:注:该操作流程通常用来检测转染了萤火虫荧光素酶基因的真核细胞中荧光素酶表达的活性,不适用于对细菌荧光素酶进行检测。1.实验***天,消化并接种细胞(根据具体实验选择合适的细胞)于35mm细胞培养皿,置于5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱内培养过夜。2.等细胞密度达到70%时用Luciferase报告基因质粒、LacZ的表达质粒及其它质粒(根据具体实验确定)共转染细胞(根据具体实验选择转染方法,如磷酸钙沉淀法、PEI、lipofectamine2000等均可)。3.转染24-36h后,吸取培养液,用预冷的PBS(无钙和镁离子)洗涤细胞。注:荧光酶的酶促反应会被痕量的钙所抑制,故用磷酸钙转染的细胞在收集细胞前应充分洗涤除去含钙介质。4.在每个培养皿中加入350μl预冷的harvestbuffer,于4℃或冰上放置10min裂解细胞。5.在细胞裂解期间,准备足量的ml微量离心管,将ATPbuffer与luciferinbuffer以1:,每管100μl。6.依次取等体积的细胞裂解液(100μl)至步骤5中的离心管中,迅速混匀,在发光仪(Luminometer)上读取吸光值。注:发光反应会迅速衰减,将细胞裂解液加入反应液后5s内必须读取吸光值。7.确保以相同操作手法读取全部样品吸光值后。

    萤火虫荧光素酶(Luciferase)是一种常用的信号分子,可以用来标记肿瘤细胞.一.细胞方法将带有荧光素luc转酶报告基因的真核表达重组质粒pRc/CMV2-7,利用G418筛选,获得稳染人乳腺哎细胞株MCF-7-luc,并在稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆MCF-7体外评价其发光能力。通过建立裸鼠移植瘤模型,利用活题生物发光成像系统检测肿大的瘤生长及转移情况,为下一步监测裸鼠移植瘤对药物作用的变化情从而为分析药物对肿大的瘤的治的好效果提供理想的状况.G418筛选浓度的确定:37℃细胞培养箱中常培养,G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml设置6个浓度梯度。在细胞接种24h后,加入6孔板中,每个浓度设2个孔在10~14d内全部死亡。每天观察细胞生长情况,死亡更低的G418浓度,即为筛选质粒转染克隆MCF-7细胞的浓度。1)细胞转染取对数生长期的MCF-7细胞,将细胞接种于6孔板内待细胞融合度达到80%~90%孔培养板中,TM即可转染。按照Lipofectamine2000试剂盒操作指南进行转染。在250μl无血清、无双抗的DMEM培培养基中加入luc质粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl无血清、无双抗的DMEM培养基中加入10μlLipofectamineTM2000,室温培育5min。将上述2种稀释液混匀。光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。

    SodiumSalt/D荧光素钠盐分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol纯度:高级纯()应用:1)体外化学发光分析(invitro);2)***成像实验(invivo);3)高灵敏度ATP分析;步骤:Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/体外生物发光检测1)用mL蒸馏水溶解gD-荧光素钠盐,配制成100mM的储存液(200×,浓度30mg/ml)。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。2)用组织培养基1∶200稀释储存液,配置工作液(终浓度150μg/mL)。3)去除培养细胞的培养基。4)待图像分析前,向细胞内添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析。Protocol2:Invivoanalysis/***成像分析1)用无菌的PBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-荧光素钠盐工作液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,尤其是体内***成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光(见下图)。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化。ATP作用下的D-荧光素钾盐什么样。南通荧光素钠盐D-荧光素钾盐

D-荧光素也常用于身体的外部研究。泰州ATPD-荧光素钾盐发射波长

    而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种,而叩甲总科(包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫)则有更多,因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫(Photinuspyralis)。荧光素酶报告基因(Luc)是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。荧光素酶是能够催化不同底物氧化发光的一类酶,哺乳细胞无内源性荧光素酶。更常用的荧光素酶有细菌荧光素酶、萤火虫荧光素酶和Renilla荧光素酶。细菌荧光素酶对热敏感,因此在哺乳细胞的应用中受到限制。萤火虫荧光素酶灵敏度高,检测线性范围宽达7~8个数量级,是更常用于哺乳细胞的报道基因,用荧光比色计即可检测酶活性,因而适用于高通量筛选。随着具有膜通透性和光裂解作用的萤火虫荧光素酶的应用,无需裂解细胞即可检测酶活性。Renilla荧光素酶催化肠腔(coelenterazine)氧化,产物可透过生物膜,可能是更适用于活细胞的报告分子。将荧光素酶报告基因载体转染到细胞中。泰州ATPD-荧光素钾盐发射波长

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