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宿迁专业做D-荧光素钾盐溶液怎么保存

来源: 发布时间:2022年05月29日

    萤火虫荧光素酶(Luciferase)是一种常用的信号分子,可以用来标记肿瘤细胞.一.细胞方法将带有荧光素luc转酶报告基因的真核表达重组质粒pRc/CMV2-7,利用G418筛选,获得稳染人乳腺哎细胞株MCF-7-luc,并在稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆MCF-7体外评价其发光能力。通过建立裸鼠移植瘤模型,利用活题生物发光成像系统检测肿大的瘤生长及转移情况,为下一步监测裸鼠移植瘤对药物作用的变化情从而为分析药物对肿大的瘤的治的好效果提供理想的状况.G418筛选浓度的确定:37℃细胞培养箱中常培养,G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml设置6个浓度梯度。在细胞接种24h后,加入6孔板中,每个浓度设2个孔在10~14d内全部死亡。每天观察细胞生长情况,死亡更低的G418浓度,即为筛选质粒转染克隆MCF-7细胞的浓度。1)细胞转染取对数生长期的MCF-7细胞,将细胞接种于6孔板内待细胞融合度达到80%~90%孔培养板中,TM即可转染。按照Lipofectamine2000试剂盒操作指南进行转染。在250μl无血清、无双抗的DMEM培培养基中加入luc质粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl无血清、无双抗的DMEM培养基中加入10μlLipofectamineTM2000,室温培育5min。将上述2种稀释液混匀。D-荧光素钾盐运输条件是4℃冰袋运输。宿迁专业做D-荧光素钾盐溶液怎么保存

    D-荧光素钾盐是一种化学品。中文别名:(S)-4,5-二氢-2-(6-羟基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸钾盐英文别名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt产品描述D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内活题成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素底物能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的慢病毒转染入细胞后构建稳定表达细胞株,构建原位肿大的瘤模型,之后注入荧光素底物,通过IVIS系统来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或进行药物药效评价等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。注:在抗肿大的瘤药物药效评价试验中,由于生物自发光检测需要根据荧光素表达标定肿大的瘤大小,受肿大的瘤生长所发生的肿大的瘤内部坏死影响,生物自发光并不能很覆盖面广的评价肿大的瘤生长,在抗肿大的瘤药效评价有较高要求的实验中,建议使用小动物核磁成像系统检测肿大的瘤生长。D-荧光素也常用于体外研究。荧光素酶编码基因D-荧光素钾盐浓度D-荧光素也常用于身体的外部研究。

    经HE染色后观察细胞的病理形态学。活题动物成像技术是近期发展起来的一种新型稳定可靠,是检测动物体内分子及细胞事件的影像检测技术,强有力手段。利用生物发光成像(BLI)可以对活题病灶的大小进行无损伤直观准确检测。我们有自己的独自有机合成实验室,可以生产合成各种化学发光试剂,我们可以提供化学发光试剂、化学发光底物、发光标记物、发光增强剂、染料探针类、微生物和酶的显色底物以及体外诊断试剂。相关列表鲁米诺/3-氨基苯二甲酰肼/发光氨异鲁米诺/4-氨基邻苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇丙的酮酸三(环已胺)盐PEP0c835bf4-aae2-43c1-be81-e57液肝素锂乙二胺四乙酸二钾/EDTA二钾血清分离胶/血液分离胶肝素抗凝剂乙二胺四乙酸三钾/EDTA三钾血液促凝剂高效促凝粉高效硅化剂水溶性硅化剂草酸钾钙离子螫合抗凝剂弱效抗凝剂吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4结合物吖啶酯-T3结合物吖啶磺酰胺盐-N-乙胺基马来酰亚胺吖啶磺酰胺盐-T4结合物吖啶磺酰胺盐-T3结合物生物素-T4结合物化学发光分析试剂及标记物生物素-T3结合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PE。

    短期保存:4℃干燥避光长期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期长期保存:有效期一年工作液:先用现配使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3)去除细胞培养基。作者:思存链接:zhuanlan./p/来源:知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权,非商业转载请注明出处。高斯荧光素酶近年来,其他荧光素酶(例如高斯荧光素酶)的使用有所增加,因为这些报告基因较小,并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质,可通过氧气催化腔肠素氧化,产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite™高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒(#AAT-12530)使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时,产sheng发光产物,该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点:提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度。做D-荧光素钾盐测试找哪家公司?

    并实现了在非常高通量的应用中使用报告基因检测。[1]随着UltraGlo™萤光素酶的发展,现在已经实现了“加样-读数”的ATP检测方法。ATP是细胞健康的重要指标,这使得CellTiter-Glo®能有效测定细胞活力,尤其是在高通量应用中。该检测原理还促进了其它ATP检测平台的诞生,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo®(2004年)和ADP-Glo™(2009年)酶检测系统。[1]2003Caspase-Glo®3/7检测除了可以利用萤火虫萤光素酶反应测定样品中萤光素酶或ATP的含量外,还可以检测底物(luciferin)浓度的变化。通过将luciferin与可被不同酶类识别并产生反应的保护基团偶联,能对这些酶进行灵敏的“加样-读数”检测,如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo™萤光素酶检测系统随着对萤火虫萤光素酶化学反应的进一步了解以及Promega生物学家和化学家团队的建立,一种改进的luciferin面世,能更好地用于典型的报告基因检测应用。这种新的底物——fluoroluciferin,是新型底物开发的一个早期实例。[1]2012NanoLuc®萤光素酶基于定向进化和新型底物开发方面的经验,研究人员从虾的萤光素酶改造设计出一种新型萤光素酶报告基因,即NanoLuc®萤光素酶。D-荧光素钾盐检测是个人合作吗?徐州体外研究D-荧光素钾盐活题成像

D-荧光素钾盐使用的注意事项。宿迁专业做D-荧光素钾盐溶液怎么保存

    但是上一次底物的残留曲线可以知道,可以控制对下一次观察结果的影响。储存与运输一般放在-20℃的冰箱即可,半年以上不使用放在-80℃的冰箱,溶解配制后放在4℃冰箱,短期运输放在4℃环境。建议现用现配,D荧光素钾盐在液体中容易降解。应用领域肿大的瘤,干细胞,药物开发,基因治的好,转基因小鼠,免疫学等等。英文名字firefly.中文名称荧光素酶,重组荧光素货号AAT-12500规格¥1430/1mL背景资料:荧光素酶是来自北美萤火虫(Photinuspyralis)中荧光素酶基因的克隆和重组表达,它为实验研究或者用生物荧光试剂制备试剂盒检测ATP或者荧光素底物提供了可信度和可靠性。这种重组酶可以克服由天然资源纯化获得荧光素酶时受季节和地方区域变化的影响。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence),可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光,常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。产品形式提供的荧光素酶*重组荧光素*产品为溶液形式。作者:思存链接:zhuanlan./p/来源:知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权,非商业转载请注明出处。宿迁专业做D-荧光素钾盐溶液怎么保存

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