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来源: 发布时间:2022年05月25日

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    用移液器反复吹打。【注】:加入TotalRNAExtractionReagent前应避免洗涤细胞,否则会增加mRNA降解的可能性。裂解某些酵母和细菌可能需要使用匀浆器。C.动、植物组织取-70℃冻存动物组织在液氮中充分研磨,按照表1加入适当量TotalRNAExtractionReagent混匀。或取新鲜动植物组织尽量剪碎,加入适当量TotalRNAExtractionReagent,匀浆仪进行匀浆处理。【注】:样品体积不要超过加入TotalRNAExtractionReagent体积的10%。2)将匀浆样品剧烈震荡后在室温条件下放置5分钟以使**白体完全解离。3)(可选)4℃,12000g离心10min,取上清。【注】:离心可去除样品中较多蛋白质、脂肪、多糖或肌肉,植物的块茎结节等。离心后的沉淀中包含有细胞外膜、多糖以及高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织样品时,上层是大量油脂应尽量去除,取澄清的匀浆液进行后续实验。2.总RNA提取1)向上述裂解液中加入1/5体积氯仿(如每1mLTotalRNAExtractionReagent加入mL氯仿)。盖紧离心管盖,剧烈震荡15sec,室温静置2-3min。2)4℃,12000g离心10-15min。【注】:①离心后混合物可分3层:上层无色水样层,中间层,下层红色有机苯酚氯仿层。RNA存在于水样层中。

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    不过,这些核糖体的基本结构和功能一致。[2]核酶科学家在研究RNA的转录后加工时发现某些RNA有催化活性,可以催化RNA的剪接,这些由活细胞合成、起催化作用的RNA称为核酶。许多核酶的底物也是RNA,甚至就是其自身,其催化反应也具有专一性。[2]已经阐明的天然核酶有锤头状核酶、发夹状核酶、I型内含子、Ⅱ型内含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基转移酶等。如何评价核酶的理论意义与实际意义,如何看待核酶与传统意义上的酶在代谢中的地位,都有待进一步研究。[2]1.核酶发现核酶更早由Cech和Altman(1989年诺贝尔化学奖获得者)发现。1967年,Woese、Crick与Orgel等基于RNA二级结构的复杂程度提出其可能有催化活性;1982年,Cech在研究四膜虫rRNA前体剪接时发现其内含子有自我剪接活性;1983年,Altman在研究细菌tRNA前体时发现核糖核酸酶P中的MRNA参与tRNA前体转录后加工;1982年,Kruger等建议将有催化活性的RNA命名为“ribozyme(核酶)”。 南京六合区RNA哪家便宜?上海专业做RNA提取

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