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动物源PCR荧光探针法

来源: 发布时间:2023年12月26日

巧亦捷(ingeNova)是翊新诊断技术(苏州)有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌,以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测,非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测,牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测,人畜共患病核酸检测,以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台,巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。动物源PCR荧光探针法

动物源PCR荧光探针法,PCR

开展动物疫病检测,有利于及时明确动物病因及根源所在,降低疫病发生率,提高诊疗效果,促进养殖业可持续发展。可以对动物疫病起到预防作用,真正准确分析当前动物疫病的流行特征及其可能对周边造成的危害。提高动物产品质量,使人们的食品安全得到尽可能的保障。现阶段主流的动物疫病检测方法主要有传统检测、血清学检测和核酸检测。核酸检测作为动物疫病检测中常用的方法之一,具有实验周期短、灵敏度高、特异性强、实时定量等优势。江苏动物疾病PCR动物检疫巧亦捷的品牌主张为:用心关爱每一个生命健康。

动物源PCR荧光探针法,PCR

样本处理、核酸提取、PCR扩增和数据处理是PCR的四个步骤。其中核酸提取可以帮助研究人员准确地快速地分离细胞或分子材料中的有效核酸,并获得足够的样本为后续实验提供依据。无论是病毒、细菌还是体细胞,遗传物质都不是裸露在细胞外,都是在细胞内。需要有一个核酸提取试剂将遗传物质释放到外界,保证PCR反应效率。将核酸释放出来后,提取与纯化过程中同样需要将样本中的一些PCR抑制物去除掉,获得纯度比较高的核酸,比较大限度的保证PCR反应中抑制物的浓度降低,提高核酸检测的准确性。因此核酸提取与纯化这一步,也是保证PCR反应结果的关键一步。巧亦捷核酸检测一体机采用磁珠法提取,效率高且可确保结果更准确。

PCR(PolymeraseChainReaction)是一种复制核酸片段并提高DNA产量的技术,即所谓的聚合酶链式反应,这种技术可以在数小时内大量复制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特异性的特点,PCR技术被应用在宠物疾病分子的诊断上,将从疑似患病宠物(血液、眼鼻分泌物、粪便,尿液或腹水)中采样的极微量病原(细菌、病毒或寄生虫)特定核酸片段样本,透过PCR的方式大量被复制,再以核酸电泳的方式判读结果,从而获得早期、快速、稳定和准确的诊断结果.PCR检测正越来越多的被动物临床医师所接受,并广泛应用于动物临床疾病诊断。

动物源PCR荧光探针法,PCR

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。宠物传染病检测技术方面,核酸检测方法具有极高的灵敏度和特异性,可很大程度缩短传染病检测的窗口期。动物源PCR荧光探针法

传统的免疫学检测(如:荧光和胶体金)存在灵敏性和特异性的局限性。动物源PCR荧光探针法

巧亦捷核酸检测一体机的特异性及灵敏度可达99%以上,使用的PCR荧光探针技术不但可以检测出病毒的种类,更可以检测出样品里100个/ul数量级的病毒数量,可谓特异性极强,准确度极高!若检测出有病毒,但没有发病也要引起重视,因为检测的病毒是一些对动物机体伤害极大的病毒,或者是人畜共患病,虽然现在没有发病,并不表明以后不会发病,如果任其在体内发展,等到病毒繁殖到一定的数量后,或者机体的抵抗力突然下降,也许就会发生灾难性的爆发,对动物造成极大的伤害。动物源PCR荧光探针法