天津医疗细胞培养基

    细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方。M199含有独特的成分，包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶、以及其他的维生素。天津医疗细胞培养基

    其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍。MEM（MinimalEssentialMedium）培养基MEM（MinimalEssentialMedium）培养基有含Earle's平衡盐的类型，也有含Hanks'平衡盐的类型；有高压灭菌型的，也有过滤除菌型的；还有含非必需氨基酸的类型。是基本、适用范围广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好，常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基础上改良，增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交瘤细胞培养，以及无血清培养的基础细胞培养基。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计，含有BSS、21种氨基酸、维生素等，适于多种正常细胞和肿瘤细胞的培养，也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素。天津医疗细胞培养基Eagle培养基由Harry Eagle在Eagle基本培养基（BEM）的基础上发展而来的。

    RPMI-1640细胞培养基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美国纽约州法罗市的罗斯韦尔公园纪念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）开发出来的，RPMI是该研究所开发的一类细胞培养基，1640是培养基代号。RPMI-1640是改进型的McCoy‘s5A培养基，采用碳酸氢盐缓冲系统，与大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培养基**初是为淋巴细胞培训专门设计的，现在已普遍应用于各种正常细胞和恶性**的培养，包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和恶性**，是采用极其普遍的培养基之一。RPMIRPMI1640培养基相比之下其他培养基之所以具与众不同的功效，是因为其中富含还原剂谷胱甘肽和高浓度的维他命。RPMI1640培养基包含生物素、维他命B12以及PABA，这些成份是Eagle’sMEM和DMEM所不具备的。针对普遍的细胞培养应用，我们提供多种组分的RPMI1640改进培养基。

RPMI-1640细胞培养基已广泛应用于各种正常细胞和ai细胞的培养，包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和ai细胞，是使用较广的培养基之一。

HEPES是一种优良的生物缓冲剂，对细胞无毒性作用，添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围，可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂，用以持续监测培养液的酸碱度，在低PH值时酚红使培养液呈黄色，而较高的PH值时使培养液呈紫色，PH值～，常适合细胞培养。但酚红也有一些缺点，研究表明酚红可以模拟固醇类（特别是雌）的作用，因此在用到雌敏感的细胞时（如乳腺组织），比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外，一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”。 大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培养基初是为淋巴细胞培养专门设计的。

    Grace’s昆虫培养基是由Grace改良的Wyatt培养基，该培养基与昆虫血淋巴的化学成分更为相近，Grace使用这种培养基成功建立了***个昆虫连续细胞系。Grace’s昆虫培养基**初用于澳大利亚白星橙天蚕蛾(Anthereaeucalypti)细胞的培养，适当补充添加剂后，Grace’s昆虫培养基可用于培养各种昆虫细胞，包括多种鳞翅类以及一些双翅类昆虫的细胞。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分，但不含蛋白质、脂类或任何生长因子，故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。Grace’s补充昆虫细胞培养基**初设计用于澳大利亚白星橙天蚕蛾(Anthereaeucalypti)的细胞生长。Grace’s补充昆虫培养基目前***用于草地贪夜蛾细胞Sf9和Sf21的生长。Sf9和Sf21细胞常规使用于杆状病毒表达载体系统(BEVS)表达重组蛋白。本产品含有水解乳蛋白、酵母粉、L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。Grace’s补充昆虫培养基含有Grace’s昆虫细胞培养基（PM152011）中不常见的水解乳蛋白和酵母粉，此产品需搭配血清或无血清添加物使用。 DMEM/F12培养基含有多种微量元素，广泛应用于多种哺乳类细胞的培养。天津医疗细胞培养基

M199全称Medium 199，广泛应用于各种动物细胞的培养，包括一些非哺乳类动物细胞。天津医疗细胞培养基

    MEMα是一种改良的MEM培养基，与MEM培养基相比MEMα培养基营养更为丰富，在MEM的基础上又添加了NEAA、**酸钠、硫酸锌、VB12、生物素、抗坏血酸等成分，广泛应用于各种哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养。不含核苷和脱氧核苷的MEMα培养基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型细胞的筛选培养基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（Alanyl-glutamine，Ala-Glu），又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽，是一种高级细胞培养添加剂，可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养素，但其在溶液中不稳定，会自发降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨对细胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定，不会自发的降解。细胞利用其机制是：在细胞培养时，细胞会逐渐向培养液中释放一种肽酶，将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后细胞会将这两种水解产物吸收利用。细胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养策略相似，连续的将低浓度水平的L-谷氨酰胺加入到培养液中，从而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不会生成多余的氨，更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺，适用于所有的细胞，几乎无需适应。 天津医疗细胞培养基

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