提取高质量的细胞核用于倍性检测至关重要，Peng 等比较了刀切法和研磨法提取棉花细胞核的效果，结果发现，刀切法提取的细胞核质量更高，因此我们选择刀切法来提取棉花细胞核。根据其他植物材料已有的研究报道，植物取材需要考虑样品易获性、细胞核型的稳定性和保存性等因素。如果材料选取不当，会导致提取的细胞核颗粒较少，生成大量的杂质，甚至形成变异系数较大的 DNA 峰。本研究以棉花的老叶和嫩叶为材料制备样品进行对比，结果表明棉花幼嫩叶片检测效果好，完全可以作为倍性鉴定试材。流式细胞术检测对象：单细胞悬液或生物颗粒。华南地区双螺旋生物仪器倍性分析仪技术
CyFlowPloidyAnalyzer倍性分析仪一体化设计专一用途流式细胞仪：1、配备HighPower365nmUVLED和532nm绿色激光器，较高效激发DAPI和PI2、流速0.2ul/s-20ul/s之间精确连续可调3、可选配自动上样器，兼容48孔板，96孔板及2ml流式管4、具备相对计数功能5、有多种倍性检测配套试剂，保证实验结果精确可靠5、适用于多种植物组织检测，包括叶，根，花，种子等是检测动植物倍性较好的机器。具有特殊配置，较高效激发DAPI和PI染料。结合配套试剂，2分钟完成植物倍性分析实验。华南地区双螺旋生物仪器倍性分析仪技术利用流式细胞仪，溶液中的细胞以每秒1万个细胞的速度通过仪器的激光检测区，进而对细胞进行检测和分析。
CyFlow Analyser倍性分析仪为DNA倍性分析和基因组大小检测提供了专门且适合的DNA荧光染料(DNPI、PI等)。进行基因组大小分析需要通过DNA嵌入染料进行化学计量染色，该染料应该具有较低的DNA峰值变异系数。所使用的365nm的紫外光源可以高效激发DAPI，DAPI作为一种荧光染料具有众多优点，众所周知的高分辨率DNA直方图、简单易用、且具有对其他细胞成分较低的敏感性等，这些特点使DAPI成为DNA倍性分析和异倍体分析的较好佳料。除DAPI外，532nm激光激发可以更高效的碘化丙啶（PI）染料，相比传统流式细胞仪使用的488nm激发，532nm激发下的PI得到的数据更准确。
实验仪器：Sysmex CyFlow® Ploidy Analyser 倍性分析仪（Sysmex Partec）试剂盒：CyStain® UV Precise P（Sysmex Partec）实验步骤：1、取新鲜待测植物叶片 0.5 平方厘米，置于培养皿中2. 取 Partec CyStain UV Precise P 裂解液 400ul 加于植物叶片周围，用刀片将叶片切碎，以充分提取出完整的细胞核，持续 30-60 秒3. 将培养皿中的液体用 30um 滤网过滤至样品管中4. 向样品管中加入 Partec CyStain UV Precise P 的 DAPI 染液 1600ul5. 上机（CyFiow Analyser倍性分析仪）检测。CyFlow Analyser倍性分析仪是款紧凑型流式细胞仪，可用于植物、动物以及微生物的倍性分析。
流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节 分辨率为零。待测样品(如细胞、微球、精子或细菌等)被制成单细胞悬液，在一定压力下被鞘液包裹着形成单列的细胞进入流动室，并与激光束相交。细胞被激光激发后产生散射光和荧光，经光电转换器处理后变为电信号，在电脑上以数字信号的形式展现出来。CyFlow Analyser倍性分析仪灵活便捷：结构紧凑，便于移动，适用于多种工作场所。华南地区Sysmex倍性分析仪
CyFlow Analyser倍性分析仪的特点：1、方便快捷2、多功能性3、高精确性4、灵活便捷5、独特的仪器设计；华南地区双螺旋生物仪器倍性分析仪技术
流式倍性分析仪技术指标：1.原装进口产品。 2.配备三个光源：20mw 488nm蓝宝石固态激光器，50mw365nm UV LED紫外激光器和30mw532nm绿色激光器，用于DAPI、Hoechst、FITC、PI、PE、PE-Cy5、PerCP等染料的激发。具有FSC，SSC，FL1，FL2，FL3，FL4光学通道。配套插拔式滤光片，所有光学通道均采用光电倍增管（PMT）技术以保证结果稳定、抗干扰能力强。光电倍增管电压可通过软件调节，范围0.1～999.9，较小可以0.1步进调节。 3.检测分辨率（全峰宽变异系数）：CV≤1％。 4.颗粒检测范围：0.1～200um。 5.样品分析速度：＞2500颗粒/秒。 6.具有相对计数**技术，无需内参照微球可自动进行每个测试的相对计数，可实现定量检测。 7.高精度石英流动室。 8.具备Ocular监测装置，内置CCD相机进行检测区实时监测。 9.具有自动进样器升级空间，升级后可兼容10、20、30、40管或96孔板模式。华南地区双螺旋生物仪器倍性分析仪技术
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