蓝色标本保色液

加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早；但是也不能太晚，因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大，增值较慢，时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没，终导致筛选不出阳性克隆，一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降，所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。培养液:加药筛选约6天左右，细胞会大量死亡，孔中只剩下的细胞。这时会出现两个问题：1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质，导致那些有neo表达的阳性细胞死亡，即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少，细胞之间的信号会变得很弱，也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液：假如你要转染3T3细胞，在3T3细胞汇合度达到80%的时候，换液，培养过夜之后收集培养液，通过滤器消毒，和新鲜的培养液按1：1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。检测试剂盒使液体充沛混合均匀，也使其得到充沛的反应。蓝色标本保色液

hochest染色和DAPI染色有什么区别：1、每个染料有自己独特的激发谱线和发射谱线.这也是以上两个染料的主要区别. 另外Hoechest 33258 是膜透性的,因此在活细胞时候能轻松进入;DAPI是半透性的,有选择性的进入.因此Hoechest 33258 一般用来染活细胞,可以长驱直入;DAPI一般是染固定细胞.2、两者都可以用紫外看，参见以下的激发发射波长Hoechst 33258的较大激发波长为346nm，较大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，较大激发波长为352nm，较大发射波长为461nm。DAPI的较大激发波长为340nm，较大发射波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，较大激发波长为364nm，较大发射波长为454nm。文齐氏液注意事项：避免反复冻融。

检测试剂盒标本保存方法：标本凝集不全。在没有促凝剂和抗凝剂存在的状况下，正常血液搜集后1/2~2h初步凝聚，18~24h完全凝聚。临床查验工作中，有时为了争取时刻快速检测，常在血液还未初步凝聚时即强行离心分别血清，此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原，在测定过程中可以构成肉眼可见的纤维蛋白块，易形成假阳性作用；这类状况于次日复查时因血凝已完全，血清中不再有纤维蛋白原存在，故复查作用变为阴性。为避免上述烦扰作用，处理的办法是血液标本搜集后有必要使其充沛凝聚后再分别血清，或标本搜集时用带分别胶的采集血液管或于采集血液管中加入适当的促凝剂。

检测试剂盒标本保存方法：标本管中增加物质的影响。抗凝剂、酶抑制剂及快速分别血清的分别胶等均对测定有必定烦扰作用。标本溶血。由于各种人为原因引起的标本溶血，均可因红细胞破坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为符号的测定中，会导致非特异性显色，检测试剂盒烦扰测定作用。为打败上述烦扰作用，标本搜集时有必要留意避免溶血。标本保存不妥。 在冰箱中保存过久的标本，血清中IgG可聚组成多聚体、AFP可构成二聚体，在间接法测定中会导致本底过深、乃至形成假阳性；标本放置时刻过长（如一日以上），有时抗原或抗体免疫活性削弱，亦可出现假阴性。为打败上述烦扰，测定的血清标本宜为新鲜搜集；如不能立即测定，5天内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质部分浓缩，分布不均，应充沛混合后再测定，但混匀时应轻柔，不行激烈振荡。试剂成份、纯度、用量及稳定性，才是保证试剂质量的关键所在。

pH缓冲溶液的效能指标：pH缓冲溶液抵抗外加强酸、强碱的能力可以用缓冲容量β来表示，缓冲容量的意义是，使1L缓冲溶液的pH增大1个单位时需加入的强碱（NaOH）的物质的量（mol），或减小1个pH单位时时需加入的强酸（HCl）的物质的量，显然β越大，缓冲外加强酸强碱的能力就越大。β与pH、总浓度C及共轭弱酸碱的浓度比有关。式中的C为弱酸+弱酸盐（或弱碱+弱碱盐）的总浓度，显然，总浓度越大，缓冲能力就越大。式中的两个δ分别为弱酸HA、弱酸根A-（又称共轭碱）的分布分数值，δ定义为其平衡浓度与总浓度之比（我以前在论坛中曾作过介绍），它们也是pH值的函数。数据学上可以证明：恒定C时，当两个分布分数值均等于0.5时，缓冲容量较大，其实用意义是：选择缓冲溶液体系时，应该选弱酸与弱酸盐的浓度比接近1，而pH值仍能满足配制要求的体系，对于弱碱及弱碱盐溶液，也有同样的要求。检测试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。甘油明胶封片剂

检测试剂盒可在试管中按规则的稀释度稀释后再加样。蓝色标本保色液

非变性PAGE蛋白上样缓冲液(2X) (Native Gel Sample Loading Buffer，2X)，, 是一种以溴酚蓝为染料的2倍浓缩液的非变性PAGE蛋白上样缓冲液，试剂中不含有SDS，DTT。可用于非变性的蛋白样品上样及其它分析。使用说明：1)按照1份蛋白样品加入1份非变PAGE蛋白上样缓冲液(2X)即1：1的比例混合，即可上样，电泳。2)通常电泳到当溴酚蓝染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。注意事项：1)SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X)中含少量DTT和巯基乙醇，有轻微刺激性气味。2)SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X)必须完全溶解后再使用。3)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。蓝色标本保色液