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流式细胞免疫荧光分析

来源: 发布时间:2023年03月05日

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些?1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液,怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果?另外,不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果,抗原抗体反应有前带和后带效应,必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全,对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合;建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验,这是比较好的时间和次数。若不行,还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低;4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化,我建议你一定要首先做个阳性对照片,排除抗体等外的方法问题。LabEx多因子检测技术应用。流式细胞免疫荧光分析

Q:多因子实验还用的样本类型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测?A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。Q:为什么要做预实验?A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗?A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。流式细胞免疫荧光分析高通量蛋白组学(Olink)采用独有的 PEA,邻位延伸分析技术检测蛋白标志物。

免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫组化/免疫荧光)实验服务,提供样本细胞涂片、细胞爬片、组织冰冻切片、组织石蜡切片;或组织、蜡块均可。一抗(可帮忙提供,费用另计)。

PCRArray技术优势:严格的质控●多个管家基因选择,保证内参稳定性●基因组污染质控●逆转录质控●PCR质量质控极高的灵敏度●非常敏感的测定●25ng-5ugtotalRNA检测一块96孔板●500ng核酸可检测到99%的基因●极限可达到1ng,启用预扩增方案高灵敏度和宽动态范围●宽动态范围,以适应不同水平的初始基因表达高度特异性●每一对引物都经过湿实验验证,单峰解离曲线确保●难以设计特异性引物的基因具有高度特异性稳定的重现性●不同的操作者,不同的仪器都呈现较好的重现性提供专业的实验服务和完整的实验报告●试剂打包:只需提供样本,试剂+检测一站式服务●技术支持:实验中任何问题均可得到对应技术解答●实验报告:提供完整的实验结果和和完整的实验报告(包括实验材料实验步骤等)可检测多种类型的样本:LabEx提供 炎症因子、趋化因子、生长因子等高通量高灵敏检测。

基于luminex平台的xMAP技术:Luminex:应用荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。原理:应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达500个蛋白或基因。特点:1、既能检测蛋白,又能检测核酸2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。多重免疫荧光服务检测服务

多因子实验的正式实验,可以分批次检测。流式细胞免疫荧光分析

酶联免疫吸附实验(ELISA)优势:灵敏度高该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。特异性强其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由千两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。流式细胞免疫荧光分析

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