抗体稀释参考
一抗稀释范围为1mg/mL原液1：1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL，二抗稀释范围为1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL
注意事项 1.使用该产品比使用沉淀比色HRP底物检测所需的抗体浓度低。为优化抗体浓度,请进行一次系统的点印迹分析;
2. 工作液在室温下8小时内可以保持稳定,但是应该避免暴露在阳光下或任何其他强光环境,然而短期实验室照明强度不会破坏工作液的稳定性;
3. 封闭试剂有可能与抗体产生交叉反应,导致出现非特异性信号。封闭缓冲液同时也会影响系统的灵敏性,当从一种底物转换为另一种底物时,有时会出现信号衰减或背景增加的现象,原因可能是封闭缓冲液不适合新的检测系统;
4. 使用亲和素/生物素检测系统时,避免使用牛奶作为封闭试剂,因为牛奶中含有不定量的内源性生物素,会导致高背景信号;
5. 保证洗涤缓冲液、封闭缓冲液、抗体溶液和底物工作液的使用体积,以确保在整个实验过程中印迹膜完全被液体覆盖,避免膜变干。增大封闭缓冲液及洗涤缓冲液的使用量可以降低非特异性的信号;
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血清是什么意思？
要认识血清，首先要明确全血和血浆的概念。全血包括血细胞和血浆，血浆是全血除了血细胞外的淡黄色液体，包括水、白蛋白、球蛋白、电解质、各种凝血因子等，当全血中加入抗凝剂，经离心后除去血细胞即可分离获得血浆。而血清为全血自然凝固（凝血系统）形成血凝块后析出的淡黄色液体，虽然肉眼观与血浆没有什么区别，但二者所含成分不同，主要区别在于血清不含纤维蛋白原。
血清是指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质，提供和各种生长因子，提供结合蛋白，提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。
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避免产生沉淀物1、解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃，实验显示非常容易产生沉淀物。2、解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。5、若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。
血清的鉴别方法
血清
血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆比较大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。血浆血浆是血液的液体成分，血细胞悬浊于其中。人体含有2750-3300毫升血浆，约占血液总体积的55%。血浆的绝大部分是水（体积的90%），其中溶解的物质主要是血浆蛋白，还包括葡萄糖、无机盐离子以及二氧化碳。血浆的主要功能是运载血细胞，同时也是运输分泌产物的主要媒介。
将新鲜血液离心，使血细胞沉降，上层淡黄色清液即是血浆。血浆与血清的区别是血清中不含纤维蛋白原等凝血因子。 提供各种生长因子，如胰岛素、氢化可的松、雌二醇、睾酮、孕酮.
超敏ECL发光底物（试剂盒）图像获取  1.将包在塑料纸(膜)中的印迹膜置于胶片暗盒中，蛋白质面朝上，除适用于胶片曝光的灯(如红色安全灯)之外，关闭所有灯;  注:胶片必须在曝光期间保持干燥,为获得比较好效果,采取以下措施:  确保将多余的底物溶液从膜和塑料纸上完全去除;  在整个胶片处理期间,使用手套;  切莫将印记膜置于已显影的胶片上,因为胶片上的化学物质会减弱信号。  2.将X光胶片置于膜的上面。建议***次曝光60秒。之后可调整曝光时间以达到比较好结果。化学发光反应在底物孵育后的前5-30分钟期间是**强烈的,这一反应可以持续几个小时,但强度会随时间下降,如有底物孵育后较长时间后曝光,曝光时间可能需要延长以获得较强信号。如果使用磷光存储成像设备(如Bio-Rad的分子成像仪系统)或CCD照相机可能需要较长的曝光时间;  3.使用合适的显影剂和定影剂对胶片进行显影。如果信号太强,则缩短曝光时间或将印记膜进行剥离并降低抗体浓度重新检测。上海儒安生物科技的血清好吗？北京驴血清保存
除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是蛋白外主要还有白蛋白，球蛋白。北京**igg血清 封闭
T细胞增殖试验类型 (1) 形态法：其原则是将外周血液或分离的单个细胞与适量的植物血凝素(PHA)混合，置37℃培养72h，取培养细胞作涂片染色镜检。据细胞的大小、核与胞浆的比例、胞浆的染色性和核结构以及有无核仁等特征，分别计数淋巴母细胞、过渡性母细胞和核有丝分裂相以及成熟的小淋巴细胞，以**者为转化细胞，每份标本计数200个细胞，计算转化率。 (2) 核素法：绝大多数外周血T细胞通产处于细胞周期的G0期，受特异性抗原或促有丝分裂原后，从G0期进入G1期，开始合成蛋白质、RNA和DNA前体物质等，为DNA复制准备物质基础，然后进入S期，细胞合成DNA量倍增，此时若在培养液中加入3H标记的TdR，后者掺入新合成的DNA中，据掺入的多少推测细胞增殖程度。北京**igg血清 封闭