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悬浮细胞转染试剂公司

来源: 发布时间:2022年07月10日

图3. 用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。



高效、靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果



图4. 使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。 质粒细胞转染步骤是什么?悬浮细胞转染试剂公司

转染是将外源核酸导入真核细胞的过程,是细胞和分子生物学研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物领域的科研党们绕不开的话题。然而常常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了",真所谓辛辛苦苦实验N多回,一夜回到解放前……众所周知,影响转染成功的因素非常多,包括细胞质量、核酸质量、微生物污染、转染试剂等。各种细胞使用的转染条件都可能不同,现实中也并没有一种放之四海而皆准的方案。转染试剂类型mRNA细胞&***转染试剂来助力.

用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。

靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果

使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。

将胶质瘤干细胞(3×105)接种至6孔板中,然后使用riboFECTCP转染试剂分别将5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA转染进胶质瘤干细胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots检测siRNA***效率。结果发现DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为53.21%、47.46%和46.31%。将1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以产生转染混合物。然后将混合物加入DMEM(siRNA浓度:50nM)中,与原代小胶质细胞培养48h。RT-PCR和westernblot分析检测转染效率。结果发现转染TREM-1siRNA后******了OGD诱导的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上调。连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理.

图5.Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的siRNA在单次静脉注射后可在肝脏中引起剂量反应的敲低现象。Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的剂量进行注射。随后分离血清并检测FVII蛋白的水平(Biophen显色检测)。持续敲低能力在单次注射后可观察到更长的敲低时间图6.使用三种不同浓度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究剂量效应。siRNA分子与Invivofectamine3.0试剂形成复合物后分别以1、0.5、及0.25mg/kg的剂量进行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清,并使用显色法对血清进行分析以确定FVII蛋白的敲低效果。低毒性包括**常见的DNA,用于基因编辑的siRNA,能够更快表达蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是体内转染。上海国产转染试剂类型

每孔培养体积均为100μL,细胞数目在105左右。悬浮细胞转染试剂公司

siRNA,加入HiperFect转染试剂混匀并温育5-10min,将混合物逐滴加入培养皿中混匀,培养细胞直到适当的时候检测基因沉默效果。这个快速操作流程简便到还可以用于“反向转染”,方便至极。当然,习惯用传统方法也是可以的,只要培养到细胞汇合度50%—80%进行转染就可以了。没有禁用血清、***的困扰,HiperFect真的是将实验简化到了***。适合多种细胞类型:HiPerfect可高效转染多种细胞类型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。对于原代细胞,产品手册中列出了转染原代HUVEC、成纤维细胞、角质细胞、上皮细胞和平滑肌细胞的操作步骤,贴心悬浮细胞转染试剂公司

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