冷冻细胞活化1、冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。2、细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。3、材料37℃恒温水槽、新鲜培养基、无菌吸管/离心管/培养瓶、液氮或干冰容器4、步骤：（1）操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。（2）自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。（3）将新鲜培养基置于37℃水槽中回温，回温后喷以70%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。冻存细胞负**概放多久?低温细胞冻存液如何存储
细胞冻存的操作步骤是什么配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；离心1000rpm，5min；去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的**终密度为5×106/ml～1×107/ml；将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5ml；在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。干细胞冻存液无血清细胞冻存液说明书.
用以下方法冻存细胞:4℃放置15-30分钟（一定不能省略该步骤，否则冻存液无法完全渗透过细胞膜进入细胞起保护作用）①缓速降温方法（以使用需异丙醇的Nalgene程序降温盒为例，冷冻细胞的过程中可以辅助实现缓慢降温，以达到近似于1℃/分钟）：-80℃过夜→液氮长期保存。（不推荐在-80℃长期保存；异丙醇易挥发，并且容易吸收空气中的水分，建议使用5次后更换）②逐步降温法：-20℃保存2小时，然后-80℃中保存2小时，随后可以在-196℃液氮中长期保存。
细胞冻存常用冻存液的成分如下：20％血清（FBS）、10％DMSO、70％1640培养液；或90％血清（FBS）、10％DMSO，更可防止细胞内冰晶形成。将DMSO和FBS加入DMEM中，各自含量占总体积的10%，然后滤膜过滤后分装保存备用。注意事项：1.DMSO不用高压灭菌;DMEM不能高温高压灭菌，可以过滤除菌。2.DMSO要用新的,而且要避光保存。3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)。DMSO在冻存液中的作用：DMSO在4℃时对细胞无明显毒性，分子量小、溶解度大、易透过细胞膜，降低细胞外未结冰溶液中溶质浓度，使细胞免受高浓度溶质的损伤,细胞内水分也不会过分外渗，避免了细胞过分脱水皱缩；DMSO与水分子结合，可使冰点下降，减少细胞内冰晶的形成，从而减少冰晶损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化.
冻存细胞类型：脐血及脐带组织、外周血、间充质干细胞、多能干细胞、组织样本等① 用于减轻冷冻和解冻复苏期间由温度引起的分子应激反应② 分别以2%、5%或10%USP级的二甲基亚砜（DMSO）预先配制即用型细胞冻存液冻存细胞类型：脐血及脐带组织、外周血和骨髓① BloodStor®55-5以55%（重量/体积）的DMSO（USP）级、5%（重量/体积）的葡萄糖-40（USP）级和注射液（WFI）级别的水预先配制② BloodStor®100含有**（重量/体积）的DMSO（USP级）BI细胞冻存液是什么成分?江苏淋巴细胞冻存液使用方法
既适用于一般培养细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。低温细胞冻存液如何存储
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