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上海常用转染试剂配方

来源: 发布时间:2022年06月02日

基于磷酸钙成分的转染试剂,其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物,粘附到细胞膜表面,借助内吞作用进入细胞质。pH值,钙离子浓度,DNA浓度,沉淀时间,细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响,因此实验条件摸索和优化时间较长,且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。此方法操作简单,重复性好,在体外转染中有很高的效率,但具有一定的细胞毒性,可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响,需要去除血清。细胞培养系列 | 专为 293T 优化的转染试剂 Nano293T.上海常用转染试剂配方

LipoFectMax™转染试剂 LipoFectMax™转染试剂具有以下几个优点:高转染效率,适用于多种细胞系对细胞毒性低适用于DNA和RNA的转染转染前无需去除细胞培养基或血清转染后无需清洗细胞或更换培养基

1转染效率高,适用于多种细胞系图1. LipoFectMax™转染试剂以绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒转染几种常见细胞系,通过检测GFP信号比较转染效率。

2细胞毒性低图2.LipoFectMax™ ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。 体内转染试剂配方一般会同时设置对照,对RNAi结果进行比较。RNAi的成功取决于正确导入合适量的siRNA,达到比较大预期反应。

在难转染细胞(原代大鼠动脉平滑肌细胞)转染效率的比较

图片由芝加哥大学肺和重症护理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用 LipoD293™试剂(左图)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右图)分别将 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染 24 小时后,用尼康 Eclipse 2000 荧光显微镜检测 GFP 荧光,以此来评价转染效率。

对难转染细胞 LNCap 细胞转染效率的比较

图片由罗斯威尔公园**研究所(Roswell Cancer Institute)的 Lyn Gao 博士友情提供



siRNA,加入HiperFect转染试剂混匀并温育5-10min,将混合物逐滴加入培养皿中混匀,培养细胞直到适当的时候检测基因沉默效果。这个快速操作流程简便到还可以用于“反向转染”,方便至极。当然,习惯用传统方法也是可以的,只要培养到细胞汇合度50%—80%进行转染就可以了。没有禁用血清、***的困扰,HiperFect真的是将实验简化到了***。适合多种细胞类型:HiPerfect可高效转染多种细胞类型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。对于原代细胞,产品手册中列出了转染原代HUVEC、成纤维细胞、角质细胞、上皮细胞和平滑肌细胞的操作步骤,贴心细胞转染必备——高效低毒转染试剂.

LipoFectMax™转染试剂LipoFectMax™转染试剂具有以下几个优点:高转染效率,适用于多种细胞系对细胞毒性低适用于DNA和RNA的转染转染前无需去除细胞培养基或血清转染后无需清洗细胞或更换培养基转染效率高,适用于多种细胞系图1.LipoFectMax™转染试剂以绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒转染几种常见细胞系,通过检测GFP信号比较转染效率。细胞毒性低图2.LipoFectMax™,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。随后分离血清并检测FVII蛋白的水平(Biophen 显色检测)。慢病毒转染试剂公司

包括常见细胞类型、干细胞、原代细胞以及历来难转染的细胞类型)提供如此简便、高效的siRNA输送效果。上海常用转染试剂配方

用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。

靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果

使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。 上海常用转染试剂配方

上海儒安生物科技有限公司专注技术创新和产品研发,发展规模团队不断壮大。公司目前拥有较多的高技术人才,以不断增强企业重点竞争力,加快企业技术创新,实现稳健生产经营。公司业务范围主要包括:细胞转染试剂,ecl发光液,cck8细胞增殖,内参抗体等。公司奉行顾客至上、质量为本的经营宗旨,深受客户好评。公司深耕细胞转染试剂,ecl发光液,cck8细胞增殖,内参抗体,正积蓄着更大的能量,向更广阔的空间、更宽泛的领域拓展。