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来源: 发布时间:2022年03月21日

对CHO细胞转染效率的比较右图:使用以上转染试剂将编码荧光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和绿色荧光蛋白GFP的cDNA按照生产商的提供的转染步骤分别转染到CHO细胞。在转染24小时后,荧光素酶的活性使用Beckman公司的化学发光监测器测定;GFP阳性细胞率使用BD公司的FACS检测。左图:LipoD293试剂(升级版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的价格比较(美元/1000微升)。所有的价格是从生产制造商的网站上收集对CHO细胞转染效率的比较右图:使用以上转染试剂将编码荧带你了解性价比比较高的转染试剂-PEI转染.polviet转染试剂盒

胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要!!当然也要保证细胞状态特别好,没有细微污染,铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦!载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统,当然使用三质粒系统的小伙伴居多,一定要选择成熟商业化的载体系统!载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失,或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯:建议目的基因载体和阴性对照GFP载体是同一批,且建议每次包装都如此操作,要保证目的基因的表达载体构建纯化良好,质粒间比例得当,并且对质粒进行酶切验证。病毒转染试剂哪种好转染产品知多少:转染试剂选择工具.

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖。因此,它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系,它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后,原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命(即它们是有限细胞系),且随着传代的进行,具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位,从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说,这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便,尤其是稳定转染的克隆传代。

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产生慢***的比较

通过 LipoD293™ 试剂(升级版)和 Lipofectamine LTX(LTX)试剂将三个 cDNAs 共转染进 293T 细胞。一个 GFP 载体,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用来测定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 细胞,其次是分别添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上图)和 10 微升(下图)。

5 天后,细胞通过流式细胞仪检测。右上角的数字表明转导的细胞的百分比来测定慢***的滴度。由 LipoD293™ and LTX 产生的慢***的滴度被量化,分为是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 该试剂可将RNA导入多种细胞系,包括原代细胞和悬浮细胞.上海腺病毒转染试剂多少钱

MagTransf 磁转染试剂实现高效转染解析.polviet转染试剂盒

简介:X-tremeGENE HP DNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂,兼容含血清或不含血清的培养基,可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势:

1.简单易用的多组分混合试剂,无动物源性成分,室温稳定。

2.高转染效率,对于原代细胞和使用其它试剂难转染的**细胞系有高转染效率。

3.使用细胞毒性低的试剂,结果相关性好。

图2. X-tremeGENE HP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENE HP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENE HP,导致存活细胞量减少(图片来源于网络)。 polviet转染试剂盒