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浙江胸水外泌体western blot

来源: 发布时间:2023年01月30日

    液体活检是手术活检的微创替代方法,涵盖不同的分析物,包括细胞外囊泡(EV)、循环肿瘤细胞(CTC)、循环tumourDNA(ctDNA)、蛋白质和代谢物。几乎所有细胞都会释放外泌体,但恶性细胞释放率更高。它们是封装原始细胞的天然货物,因此可以提供了解tumour景观的窗口。外泌体通常被批量分析,这阻碍了从大型宿主EV背景分析罕见的肿瘤特异性EV亚群。在这里,我们在体外和体内分离了外泌体亚群,并表征了它们的表型和通用货物。我们使用5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)来诱导内源性荧光肿瘤特异性外泌体(EVPpIX)的释放。对来自胶质母细胞瘤(GBM)细胞系的五个不同亚群(EVPpIX、EVCD63、EVCD9、EVEGFR、EVCFDA)的分析揭示了独特的转录组谱,其中EVPpIX转录组显示与其他亚群的致瘤过程更接近。同样,与来自血浆的大量EV相比,从GBM患者血浆中分离肿瘤特异性外泌体显示GBM相关基因富集。我们建议外泌体种群的分离有助于检测和分离肿瘤特异性EV以进行疾病监测。 外泌体可以直接进入受体细胞影响细胞功能。浙江胸水外泌体western blot

除了siRNA和miRNA,mRNA也可以作为“货物”被外泌体运输。研究表明,在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分离出来的外泌体含有中流细胞特异性的mRNA,而被爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感ran的细胞分泌的外泌体中也含有EBV的潜伏期mRNA。因而,外泌体的这种运载mRNA的能力引起了中流研究者们的注意。近期,Saydam等率先报道了利用多泡体(含外泌体)负载mRNA/蛋白进行中流zhiliao的研究。研究者们利用脂质体2000或病毒载体对HEK-293细胞进行转染,使其分泌的多泡体含有mRNA/蛋白(CD-UPRT EGFP,其中CD:胞嘧啶脱氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖转移酶;EGFP:增强型绿色荧光蛋白)。将此多泡体注射至小鼠的神经鞘瘤处,并辅助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神经鞘瘤的增长被明显抑制。河南细胞上清外泌体透射电镜检测外泌体的功能取决于其所来源的细胞类型。

外泌体(exosomes)是由细胞分泌的小型双分子层囊泡,内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质,通过循环系统到达细胞和组织发挥远程调控作用。自身免疫性疾病(autoimmune diseases, ADs)是一组由免疫系统紊乱导致免疫复合物形成和沉积的慢性炎症性疾病,越来越多的证据表明,外泌体在多种ADs的病理机制中起着关键作用。外泌体主要通过影响细胞间通讯和免疫细胞的功能来参与ADs的发病机制,其自身水平和核酸的表达情况可以反映疾病的进展程度,是ADs的良好生物标志物。此外,外泌体具有生物相容性和稳定性,具有作为药物载体的潜力。本文系统介绍了外泌体在ADs中的生物学功能,并且分析了外泌体作为ADs生物标志和药物载体的潜在价值。

    缺氧已被证明会诱导细胞外囊泡(EV)的释放,并对EV的组成和功能产生影响。缺氧EV可增强内皮细胞的存活和血管生成能力,在免疫细胞中具有kang炎作用,并通过改变浸润性单核细胞和巨噬细胞的免疫代谢特征来促进tumour进展和侵袭。miR-21-5p是EV中醉常报道的缺氧诱导的microRNA(miRNA)。载有miR-21-5p的EV与转移呈正相关,促进内皮细胞的血管生成,并已被证明可以增加ai细胞的迁移、扩张和侵袭。在几项研究中,缺氧显示以缺氧诱导因子-α(HIFα)依赖性方式增加EV中miR-21-5p的水平,并且这些EV与受体的kang炎和抗细胞凋亡作用相关细胞。EVs调节受体细胞功能的能力使EVs成为诊治性诊治的有吸引力的候选者,并且从生物流体中检测背景特定EV货物改变的可能性支持它们作为生物标志物的潜力。 干细胞外泌体可直接促进血管生成,改善大脑缺氧后的损伤。

    骨髓来源的间充质干细胞(BMSC)是CA微环境的组成部分并且有助于CA进展。瘤内缺氧会影响CA和基质细胞。而外泌体被认为是细胞间通讯的介质。来自中南大学湘雅医学院附属tumour医院向娟娟课题组发表在MolecularCancer(IF=)上的文章阐明了BMSC衍生的外泌体在缺氧环境下与ai细胞之间的通讯。通过采用外泌体miRNA芯片表达谱。研究结果发现,缺氧BMSC分泌的外泌体可以被临近的肿瘤细胞摄取并促进肿瘤细胞侵袭和EMT。外泌体介导特定miRNA,包括miR-193a-3p,miR-210-3p和miR-5100从BMSC转移到上皮ai细胞后激huoSTAT3信号通路并增加了间充质分子表达。诊断检验发现血浆外泌体miR-193a-3p可以区分CA患者和非CA对照。而三种血浆外泌体miRNA联合比单独一种miRNA更好地区分转移和非转移肺ai患者。因此,研究人员认为,外泌体介导的miR-193a-3p、miR-210-3p和miR-5100的转移可通过激huoSTAT3信号诱导的EMT促进肺ai细胞的侵袭,这些外泌体miRNA可能是tumour进展有前景的非侵入性生物标志物。 外泌体被认为是一种合适的药物传递系统,因为蛋白质和遗传物质都可以装载到其中。河南细胞上清外泌体透射电镜检测

越来越多的文献证实间充质干细胞来源外泌体具有与间充质干细胞相似的作用(免疫调节、抗yan等)。浙江胸水外泌体western blot

前列腺ai患者尿液外泌体中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表达水平明显上升,表明这些miRNAs可用于前列腺ai的早期筛查。胆管ai是恶性程度较高的消化系统中流,发展隐蔽且临床症状及体征出现晚,故给早期诊断带来困难。高通量小RNA测序筛查了来自胆管ai和胆囊ai患者外泌体中一系列差异表达的miRNA,小RNA长度在正常个体、胆管ai患者和胆囊ai患者之间的分布存在明显差异,胆管ai患者的外泌体中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明显升高,而胆囊ai患者的外泌体中miR-151a-5p略有升高,为胆管ai和胆囊ai提供了一套新的生物诊断标志物。浙江胸水外泌体western blot

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