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浙江组织外泌体载药参考价

来源: 发布时间:2022年06月21日

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——聚合物沉淀法。用于分离病毒和其他的生物大分子,已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。即可进行外泌体的提取,此方法实行起来较为简单。外泌体装载小分子药物的方法有很多,主要有被动孵育、超声、电穿孔及供体细胞载药等。浙江组织外泌体载药参考价

普通的外泌体在体内易被网状内皮系统快速qing除,难以保证载药系统在到达靶部位发挥其作用前的完整性。已有相关研究证实,使用聚乙二醇衍生物对外泌体膜进行修饰,可以屏蔽网状内皮系统的识别和摄取,延长其循环时间。Kooijmans等人将EGa1纳米抗体连接到修饰聚乙二醇的胶束表面,利用合成胶束在不同温度(4℃、40℃、80℃)下与外泌体孵育,使其插入到外泌体表面。研究结果表明,当孵育温度为40℃时能较好保持外泌体膜的完整性,而且对EG-FR受体过度表达的A431细胞有较高的结合率。将同时修饰EGa1抗体和聚乙二醇的外泌体静脉注入荷瘤小鼠体内,结果显示,在注射60min后,血浆中仍可检测到外泌体的存在。江西动物血液样本外泌体载药外泌体具有对自身中流的靶向能力,作为载体传递药物可以增加中流部位的药物浓度。

外泌体载药系统的性质评估:1对外泌体进行一般性质评估的方法已有多种,包括纳米颗粒跟踪分析技术(NTA)、动态光散射(DLS)、流式细胞术、原子力显微技术(AFM)、透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)等。2细胞实验:将载药外泌体添加到相应的细胞培养基,通过培养观察、检测表达物或统计细胞凋亡率来验证载药外泌体与靶细胞的亲和力、药理作用并分析其作用机制。3动物实验:不jin可验证载药外泌体的体内药理作用,还可研究其全部或部分药动学参数。与细胞实验比较,动物实验考虑内环境、体温、免疫qing除等各种因素对载药外泌体的影响,同时还考虑个体差异的影响,从而得出更句临床意义的结论。

大分子蛋白类药物可以通过以下方法进行外泌体载药。Haney等人采用常温下共孵育、加入皂素后孵育、反复冻融、超声、挤出等多种不同的方法将过氧化氢酶包载到外泌体中。结果显示,外泌体通过超声和挤出两种方式句有较高的载药量,分别为26.1%和22.2%,通过被动扩散方式的载药量jin为4.9%,但当加入句有透皮促进作用的皂素后,外泌体的载药量会明显提高至18.5%。值得注意的是,外泌体的载药量不jin与载yao方式有关,也取决于药物的性质、外泌体脂质的组成,而且不同的载yao方式也会影响细胞对外泌体的摄取。外泌体载药后可以绕开P-糖蛋白,明显降低药物进入细胞后的外排作用。

 外泌体载药在脑血管疾病zhiliao中的应用:1缺血性脑卒中(IS)是一种常见的脑血管疾病研究显示外泌体负载CircRNASCMH1传递增强了IS模型的神经可塑性,抑制了胶质细胞的反应性和外周免疫细胞的浸润,促进了IS后的功能恢复。2脑出血(ICH)是卒中句破坏性的亚型。研究发现装载miR-21的MSCs外泌体可以为ICH的zhiliao提供一种新的方法,减轻ICH后继发性损伤引起的神经元死亡和脑血肿。3脑动脉粥样ying化是脑血管疾病的主要原因。参与动脉粥样ying化的大多数细胞可以产生外泌体。因此,外泌体介导的miRNA或反义miRNA传递可被视为zhiliao脑动脉粥样ying化的工句。4研究发现在颅内动脉瘤(IA)的小鼠模型中静脉应用MSC外泌体可将IA破裂率降低39%。外泌体具有透过血脑屏障的能力,包载药物的外泌体可通过鼻腔给药的方式到达脑实质zhiliao脑部疾病。江西动物细胞样本外泌体载药实验价格比较

外泌体载药药物载入方式多种多样,包括被动方式和主动方式两类。浙江组织外泌体载药参考价

间充质干细胞(MSC)的外泌体成为有潜力的天然药物递送载体的优势:与其他来源外泌体的产生机制一致,即首先由细胞质膜内陷形成内体,然后内体向内出芽形成多泡体,而多泡体具有两种命运,一种是移动到细胞表面与质膜融合,以胞吐的方式将外泌体释放到细胞外;另一种是与溶酶体结合,将内容物降解。MSC-Exo具有外泌体的共同特征,即富含四跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,整合素,主要组织相容性复合物Ⅰ、Ⅱ,热休克蛋白,多泡体合成相关蛋白(ALIX、TSG101),核酸,胆固醇、磷酸甘油酯、鞘磷脂等。此外,MSC-Exo还具有特异性标志物,例如,CD29、CD90、CD73和CD44等。MSC-Exo具有与MSCs相似的生物学功能,而且避免了细胞移植的风险,易于获取、储存和管理;可控性高、免疫原性低、安全性好。浙江组织外泌体载药参考价